مرکز منطقه ای اطلاع رساني علوم و فناوري - بررسي بقاي فوليكولهاي پرآنترال تخمدان منجمد شده شيشه اي موش نابالغ بوسيله كرايوتاپ

چكيده فارسي :

هدف: مطالعه تاثير انجماد شيشه اي بافت تخمدان بوسيله كرايوتاپ، بر بقايي فوليكولهاي پرآنترال است. مواد و روشها: تخمدان موشهاي 14 روزه نژاد NMRI، به روش استريل جدا شده و در سه گروه انجمادي، سمي شده و كنترل دسته بندي شدند. در گروه انجماد شيشه اي، تخمدانها با استفاده از كرايوتاپ منجمد شدند در حالي كه در گروه سمي شده و تخمدانها پروسه انجماد و ذوب را بدون قرار گرفتن در نيتروژن مايع و انجماد طي كردند و در گروه كنترل تخمدانها پروسه انجمادي و انجماد را طي نكردند. تخمدانها در دو گروه انجمادي و سمي شده، طي دو مرحله درون محلول انجمادي حاوي HEPES-buffering TCM199 به همراه اتيلن گليكول (EG:Ethylen Glycol)، دي متيل سولفوكسيد (DMSO) و آلبومين سرم انساني (HSA) قرار داده شدند. سپس در گروه تست سميت تخمدانها (توكسي سيتي)، تخمدانها بلافاصله پروسه ذوب را طي كردند و در گروه انجمادي، تخمدانها روي كرايوتاپ قرار داده شده و به درون نيتروژن مايع منتقل شدند. تخمدانهاي منجمد شده پس از سه هفته در محلول ذوب شامل HEPES-buffering TCM199 و ساكاروز HSA، ذوب شدند. ابتدا بررسي بافت شناسي تخمدانها دز هر سه گروه انجام شد و در مرحله بعد فوليكولهاي پرآنترال تخمدانهاي هر سه گروه با تشريح مكانيكي جدا شده و فوليكولها با مورفولوژي مناسب انتخاب و به مدت چهار روز كشت داده شدند تا ميزان بقايي فوليكولها در اين سه گروه بررسي شود. نتايج حاصل با استفاده از نرم افزار SPSS آناليز شدند. يافته ها: بررسي بافت شناسي تخمدانها نشان داد فوليكولهاي پريمورديال و در حال رشد دز گروههاي انجمادي توكسي سيتي مشابه گروه كنترل بودند. ميزان بقايي فوليكولها در گروه توكسي سيتي (%97.4) نسبت به گروه كنترل (%98.7) تفاوت معني داري نداشت در حالي كه ميزان بقا در اين دو گروه نسبت به گروه انجماد شيشه اي (%92.7) افزايش معناداري داشت (P<0.05). همچنين افزايش در قطر فوليكولها پس از گذشت چهار روز در گروه انجمادي نسبت به دو گروه سمي شده و كنترل، كاهش معني داري داشت (P<0.05). نتيجه گيري: عليرغم معني دار بودن تفاوت در بقا و قطر فوليكولهاي پرآنترال در گروه انجمادي نسبت به كنترل، فوليكولهاي پرآنترال حاصل از انجماد شيشه اي تخمدان، از بقاي بالايي برخوردار بوده و به نظر مي رسد استفاده از اين روش براي انجماد شيشه اي تخمدان مناسب و موفقيت آميز باشد.