اثر فاكتور رشد فيبروبلاست- 8 و خارپشت صوتي بر بيان نشانگرهاي دوپاميني در سلول‌هاي اپي‌تليال آمنيون انساني

The Effects of FGF8 and Shh on Expression of Dopaminergic Markers from Human Amniotic Epithelial Cells

زمينه و هدف: در سال‌هاي اخير‏‏‏‏ مطالعات زيادي‏‏‏‏‏‏ در زمينه استفاده از سلول‌هاي بنيادي جنيني براي درمان بيماري پاركينسون به‌عنوان يك درمان جايگزين صورت گرفته است. با توجه به اين واقعيت كه سلول‌هاي اپي‌تليال آمنيوني داراي توانايي تمايز به بسياري از سلول‌ها هستند، همچنين به‌علت عدم ايجاد كارسينوما و نداشتن مشكل اخلاقي مربوط به سلول‌هاي بنيادي جنيني، مي‏توان از آنها به‌عنوان يك منبع جايگزين در سلول‌درماني استفاده نمود. اين مطالعه با هدف بررسي اثر فاكتور رشد فيبروبلاست- 8 و خارپشت صوتي (Sonic Hedgehog) بر بيان نشانگرهاي دوپاميني در سلول‌هاي اپي‌تليال آمنيون انساني انجام شد. روش بررسي: در اين مطالعه، تمايز سلول‌هاي اپي‌تليال آمنيوني به سلول‌هاي عصبي دوپامينرژيك به‌صورت برون‏تن به مدت 21 روز با استفاده از فاكتورهاي رشد Sonic Hedgehog)) Shh و فاكتور رشد فيبروبلاست-8 (FGF8) بررسي گرديد و ماركرهاي ?-tubulin III، TH،DAT و D?H با روش ايمونوسيتوشيمي ارزيابي شدند. براي مقايسه و آناليز بين گروه‌ها از آزمون تي تست، واريانس و پس آماري توكي استفاده گرديد. تفاوت‌ها در دو سطح 01/0p? و 05/0p? ارزيابي شدند. يافته‌ها: نتايج اين مطالعه نشان داد تركيبي از فاكتورهاي رشد Shh و FGF8 سطح بالاتري از TH را در مقايسه با گروه بدون آنها يا هر كدام از آنها به تنهايي بيان مي‌كند. به‌علاوه، Shh بر ميزان بيان DAT در مقايسه با D?H مؤثرتر از FGF8 مي‌باشد. نتيجه‌گيري: اين نتايج بيانگر آن است كه سلول‌هاي اپي‌تليال آمنيوني توانايي تمايز به سلول‌هاي عصبي دوپاميني را دارند و اين توانايي تحت تأثير فاكتور‌هاي رشد Shh و FGF8 قرار مي‌گيرد.

Background and Objectives: Recently, interest has increased in the potential employment of embryonic stem cells for the treatment of Parkinsonʹs disease, which has been considered as an alternative therapeutic strategy. Due to their pluripotent differentiation potential, the finding that they do not induce carcinoma and the fact that they do not raise the ethical concerns connected with human embryonic stem cells, human amniotic epithelial cells are considered to be a very promising cell source. The aim of this study was to investigate the effects of FGF8 and Shh on the expression of dopaminergic markers from human amniotic epithelial cells. Methods: In this study, we examined the differentiation of dopaminergic neurons in vitro from AECs using the expression of several markers including TH, DAT and DpH. For dopaminergic differentiation, sonic hedgehog (Shh) and FGF8 were added to cultures and the cultures were allowed to differentiate for 21 days. Analysis of AECs derived dopaminergic neurons was performed at the TH, DAT, p-tubulin III and DpH expression levels by immunocitochemistry. The significance of the data was tested by Studentʹs t-test (between two groups) and one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey post-test. (p<0/01, p<0/05) Results: Combination of Shh and FGF8 showed the higher level of TH in comparison to control group or these factors alone. Moreover, Shh is more effective than FGF8 on DAT expression in comparison to expression of DpH. Conclusion: These results show the capability of AECs to express dopaminergic neural markers and this ability is affected by Shh and FGF8.