بررسي و مقايسه خصوصيات بيوشيميايي، ساختار مولكولي و روند تكامل ژنتيكي دو آيزوفرم تيوردوكسين نوع h از گياه انگور عسكري (Vitis vinifera L. cv. Askari)

بررسي و مقايسه خصوصيات بيوشيميايي، ساختار مولكولي و روند تكامل ژنتيكي دو آيزوفرم تيوردوكسين نوع h از گياه انگور عسكري (Vitis vinifera L. cv. Askari)

تيوردوكسين ها (Trxs) پروتيين هايي كوچك و مقاوم در برابر حرارت هستند كه در واكنش هاي تبادلي دي تيول/دي سولفيد شركت مي كنند. در مقايسه با ساير موجودات زنده، گياهان حاوي شش نوع تيوردوكسين مختلف شامل f، h، m، o، x و y مي باشند كه تيوردوكسين نوع h با داشتن اشكال چندگانه، در فرآيندهاي مختلفي همچون محافظت سلول در برابر تنش اكسيداتيو و تنش هاي زنده و غيرزنده دخالت دارد. دو ژن تيوردوكسين نوع h، تحت عناوين VvTrxh4 و VvCxxS2، از بافت حبه گياه انگور عسكري (Vitis vinifera L. cv. Askari) با استفاده از روش واكنش زنجيره اي پلي مراز با نسخه برداري معكوس (RT-PCR) جداسازي و در ناقل پلاسميدي pUC19 همسانه سازي شده و خصوصيات بيوشيميايي، ساختار مولكولي و روند تكامل ژنتيكي آن ها مورد بررسي و مقايسه قرار گرفت. بررسي توالي نوكليوتيدي نشان داد كه چارچوب خواندني ژن هاي همسانه سازي شده VvTrxh4 و VvCxxS2 به ترتيب bp345 و bp 381 طول داشته و پروتيين هايي با 114 و 126 اسيدآمينه را كد مي كنند. بررسي توالي پروتييني نشان داد كه ژن VvTrxh4 داراي جايگاه فعال معمول WCGPC بوده، در حالي كه جايگاه فعال ژن VvCxxS2 به صورت غيرمعمول و به شكل WCIPS مي باشد. وزن مولكولي محاسبه شده و نقطه آيزوالكتريك پيش بيني شده پروتيين VvTrxh4 به ترتيب برابر 76/12 كيلودالتون و 22/5 و پروتيين VvCxxS2 به ترتيب برابر 25/14 كيلودالتون و 68/4 مي باشد. بررسي هاي ساختاري نشان داد كه پروتيين هاي بدست آمده از نظر ساختار سه بعدي مشابه مي باشند. در حالي كه بررسي هاي فيلوژنتيكي ژن هاي همسانه سازي شده با تيوردوكسين هاي ساير گياهان نشان داد كه اين ژن ها متعلق به زيرگروه هاي متفاوت مي باشند. در اين تحقيق ژن VvTrxh4 متعلق به كلاس A از زيرگروه I بوده، اما ژن VvCxxS2 به كلاس B از زيرگروه III تيوردوكسين هاي نوع h تعلق دارد.