ارزيابي كارايي روش تركيبي زتا و سانتريفيوژ شيب غلظت (پيور- زتا) براي جداسازي اسپرم با ساختار كروماتين طبيعي

in isolating mature sperms with normal chromatin structureEvaluating the effectiveness of combination of Pure and Zeta methods

زمينه: از آن جا كه انتخاب اسپرم با محتواي كروماتين طبيعي براي تزريق مستقيم اسپرم به درون سيتوپلاسم تخمك (ICSI ) داراي اهميت وافري است، امروزه محققين در پي يافتن روش هايي نوين براي جداسازي اسپرمي با سلامت ساختار كروماتين و مورفولوژي مناسب مي‌باشند. هدف از انجام اين مطالعه كارايي روش جديد زتا، روش رايج سانتريفيوژ شيب غلظت Pure Sperm و نيز روش تركيبي پيور-زتا (Zeta ) از لحاظ جداسازي اسپرم با ساختار كروماتين طبيعي كه با استفاده از روش‌هاي پراكندگي كروماتين اسپرم (SCD) و كرومومايسين(CMA3) A3 مورد ارزيابي قرار گيرد. روش‌ها: اين مطالعه در روي 28 بيمار مراجعه‌كننده به مركز باروري و ناباروري اصفهان صورت گرفت. آناليز معمول مايع مني طبق معيارهاي WHO انجام شد. سپس نمونه مايع مني به چهار بخش شامل: گروه كنترل، اسپرم‌هاي جداسازي‌شده به روش زتا، اسپرم‌هاي جداسازي‌شده به روش سانتريفيوژ شيب غلظت (پيور) و اسپرم هاي جداسازي شده به روش پيور- زتا تقسيم گرديد. سپس در روي هريك از گروه‌هاي مذكور، ارزيابي مورفولوژي اسپرم (رنگ‌آميزي Diff Quick)، كمبود پروتامين (رنگ‌آميزي CMA3 ) و فرگمنتاسيون DNA (با استفاده از آزمايش SCD) انجام گرفت. نتايج با آزمون آنوا بررسي و تحليل شدند و 05/0 P < معنا دار در نظر گرفته شد. يافته‌ها: درصد اسپرم‌هاي با كمبود پروتامين و نيز فرگمنتاسيون DNA در سه گروه اسپرم‌هاي جداسازي‌شده به روش زتا، پيور و پيور-زتا نسبت به گروه كنترل از لحاظ آماري كاهش معناداري يافته است (05/0P < ). همچنين از لحاظ انتخاب اسپرم با مورفولوژي مناسب اختلاف معناداري بين اسپرم‌ هاي انتخاب‌شده توسط روش پيور و نيز روش تركيبي پيور-زتا نسبت به گروه كنترل مشاهده گرديد (05/0P < ). بين روش زتا، روش پيور و روش پيور- زتا تفاوت معناداري از لحاظ جداسازي اسپرم با مورفولوژي و محتواي پروتامين طبيعي و فرگمنتاسيون DNA وجود نداشت (05/0P > ). نتيجه‌گيري: نتايج نشان مي‌دهد كه هر دو روش پيور و زتا در جداسازي اسپرم با كيفيت مناسب از لحاظ مورفولوژي، محتواي پروتامين و سلامت DNA موثر بوده است ، ليكن روش تركيبي پيور- زتا تاثير بيشتري را در جداسازي اسپرم با مورفولوژي، محتواي پروتامين و سلامت DNAنسبت به به‌كارگيري دو روش پيور و زتا به‌صورت انفرادي دارا مي باشد.