تعيين هويت انگل‌هاي ليشمانياي جداشده از بيماران مبتلا به كالاآزار با روش واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز در استان كرمانشاه

Characterization of Leishmania isolated from Kala- azar infected patients in Kermanshah using PCR

زمينه: ليشمانيوز احشايي(كالاآزار)، بيماري انگلي مهمي است كه توسط گونه‌هاي ليشمانياي دونواني واينفانتوم ايجاد مي‌شود. شواهد نشان مي‌دهد كه ليشمانيوز احشايي در بعضي از مناطق استان كرمانشاه وجود دارد. مطالعه حاضر با هدف بررسي خصوصيات عامل ايجادكننده ليشمانيوز احشايي در اين استان انجام گرفته است. روش‌ها: در اين مطالعه تجربي از 9 بيمار مبتلا به كالاآزار بستري‌شده در بخش اطفال بيمارستان‌هاي كرمانشاه در سال‌هاي 88-1383 نمونه مغز استخوان تهيه گرديد. از اسلايدهاي ميكروسكوپي، DNA استخراج و جهت تعيين گونه انگل با روش واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز اختصاصي گونه مورد بررسي قرار گرفت. براي اين كار با استفاده از پرايمر 4LINR و 17LIN قطعه متغير از حلقه‌هاي كوچك DNA كينوپلاستي انگل ليشمانيا تكثير و بر روي ژل آگاروز 5/1 درصد الكتروفورز گرديد. يافته‌ها: تمامي بيماران به‌جز يك مورد از نظر سرولوژي با استفاده از آزمون ايمونوفلورسانس غيرمستقيم مثبت بودند. در بررسي اسميرهاي مستقيم مغز استخوان، اماستيگوت‌هاي انگل (اجسام ليشمن) به تعداد نسبتاً فراوان مشاهده شد. تمامي نمونه‌ها در آزمايش واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز، ايجاد باندي به اندازه 720 جفت باز نمود. مقايسه اين باندها با باندهاي گونه‌هاي استاندارد، مشخص نمود كه گونه انگل در تمامي بيماران ليشمانيا اينفانتوم مي‌باشد. نتيجه‌گيري: تعيين گونه با استفاده از PCR يك‌مرحله‌اي و پرايمرهاي 4LINR و 17LIN مناسب است و همچنين عامل ليشمانيوز احشايي در كرمانشاه ليشمانيا اينفانتوم مي‌باشد. بنابراين انجام مطالعه‌اي جامع در خصوص سرواپيدميولوژي بيماري در انسان و مخازن حيواني در استان ضروري است.