مقايسه روشهاي استخراج DNAاز بافتهاي پارافينه با استفاده از روش سنتي استفاده از حرارت و روش تجاري استفاده از كيت

The Comparison of different Procedures for DNA extraction from paraffin-embedded Tissues: A commercial kit and a traditional method based on heating

چكيده زمينه و هدف : بلوكهاي پارافينه بافتها و نمونه هاي كلينيكي منابع بسيار خوبي براي مطالعات باكيفيت بالا از اين بافتها با مشكلاتي مواجه است. هدف از اين DNA ژنتيك ملكولي هستند اما استخراج و روش تجاري استفاده K با استفاده از حرارت و پروتييناز DNA مطالعه مقايسه دو روش سنتي استخراج استخراج شده و همينطور ميزان موفقييت در تكثير DNA از كيت از نظرميزان بازدهي و درصد خلوص قطعات ژني مورد نظر بوده است. روش بررسي : تعداد پنجاه نمونه از بافت پارافينه سرطان كلون كه حدود پنج سال از با روش سنتي استفاده از حرارت و پروتييناز DNA . نگهداري آ نها مي گذ شت ،مورد استفاده قرار گرفت DNA استخراج شد سپس درصد خلوص و مقدا ر (Qiagen Kit) و روش تجاري استفاده از كيت K كه از TLR نمونه ها با استفاده از اسپكتروفتومتر اندازه گيري ش د. نمونه ها برا ي تكثير دو قطعه از ژن 4 bp با طول SH- قرار گرفتند. قطعه 1 PCR مهمترين گيرندها در سيستم ايمني ذاتي هستند مورد آزمايش تكثير يافته برا ي بررسي ب ا الكتروفورز روي ژل DNA . 124 تكثير شدن د bp با طول SH- 188 و قطعه 2 آگاروز 2% قرار گرفت. ( 297 ug/ml) استخراج شده با روش سنتي DNA يافته ها نتايج حاصله نشان داد كه بازده اما .( p < 176 ) به صورت معني داري بيشتر است ( 0.01 ug/ml) نسبت به روش تجاري استفاده از كيت .( p < 1) بيشتر است ( 0.01 / 1) در مقايسه با روش سنتي( 2 / با استفاده از كيت ( 7 DNA ميزان خلوص با روش سنتي در مقايسه با روش كيت بيشتر بود PCR در آزمايش DNA درصد ميزان موفقيت در تكثير موثر بود به طوري كه قطعه كوچكتر به صورت معني PCR طول قطعه بر موفقيت آزمايش .( p < 0.01 ) داشت. PCR دار نتايج مثبت بيشتري در آزمايش نتيجه گيري : از آنجا كه در روش سنتي قطعات ژني مورد نظر درنمونه هاي بيشتري تكثير يافتند و اين روش ساده تر و كم هزينه تر از روش استفاده از كيت است، پيشنهاد مي شود براي نمونه هاي استفاده شود. در DNA پارا فيني كه چندين سال از تهيه آنها مي گذرد از روش سنتي براي استخراج استخراج شده ازبلوكهاي پارافينه بهتر است قطعات كوچكترانتخاب DNA انتخاب قطعات ژني براي تكثير شوند تا احتمال تكثير موفق قطعه افزايش يابد. PCR ، بافت پارافينه شده ، DNA واژه هاي كليدي: استخراج