بررسي ملكولي جهش‌هاي حذفي ژن آلفا گلوبين در بيماران با كم‌خوني هيپوكرومي ميكروسيتي در كرمانشاه

Molecular analysis of alpha globin gene deletions among patients with microcytic hypochromic anemia in Kermanshah-Iran

زمينه: اكثر جهش‌هاي آلفاتالاسمي شامل حذف يك يا هر دو ژن آلفا گلوبين هستند. از آن‌جا كه جمعيت ايران تركيبي از گروه‌هاي قومي مختلف است، توزيع و فراواني جهش‌هاي ژن آلفا گلوبين در نواحي متفاوت نياز به بررسي دارد. اين مطالعه به‌منظور شناسايي حذف‌هاي شايع ژن آلفا گلوبين در ميان افراد با كم‌خوني هيپوكرومي ميكروسيتي در استان كرمانشاه انجام شده است. روش‌ها: پس از ارزيابي اوليه، 92 بيمار شامل 47زن و 45مرد با كم‌خوني هيپوكرومي ميكرسيتي(MCV < 80 fl & MCH < 27pg) جهت انجام اين مطالعه انتخاب شدند. تمامي نمونه‌ها براي تشخيص چهار حذف ژن آلفاگلوبين شامل -?3.7، -?4.2 ،-(?) 20.5 و MED-- با استفاده از تكنيك GAP-PCR مورد ارزيابي قرار گرفتند. پس از تكثير، 10 ميكروليتر از محصول بر روي ژل آگارز 2/1 درصد الكتروفورز شد. باندها در محلول اتيديوم برومايد نمايان و در زير دستگاه ترانس ايلوميناتور عكس‌برداري به‌عمل آمد. يافته‌ها: 45 بيمار واجد حذف -?3.7 بودند. در بيماران داراي حذف -?3.7 هم در حالت هتروزيگوت و هم در حالت هموزيگوت، مقدار MCH كم‌تر از محدوده طبيعي و ميزان هموگلوبين A2 در محدوده طبيعي بود. ساير جهش‌هاي حذفي شايع شامل -(?) 20.5، -?4.2 و --MED مشاهده نشدند. نتيجه‌گيري: فراواني حذف -?3.7 ( تنها جهش يافت شده حذفي) در بيماران با كم‌خوني هيپوكرومي ميكروسيتي در كرمانشاه 9/48 درصد بود.

Background: The majority of a-thalassemi mutations are deletions of one or both a- globin genes. Since the Iranian populaion is a mixture of different ethnic groups, frequency and distribution of globin mutations in various regions of the country need to be clarified. The aim of this study was to determine the common alpha globin gene deletions among individuals with hypochromic microcytic anemia in Kermanshah province. Methods: Following the initial evaluation, 92 patients (47 women and 45 men) were found as microcytic hypochromic [MCV < 80 fl and MCH< 27 pg] anemia and selected for this study. All samples were analyzed for detection of four a-gene deletions (-a3.7,-a4.2,- (a) 20.5 and -MED) by GAP-PCR technique. After amplification, lOjul of PCR product was electrophoresed through 1.2% agarose gel and bands were visualized by staining gel in ethidium bromide solution and photographed under a UV transilluminater. c Behbood Journal- The Scientific Quarterly- Vol 14, No.4, Winter 2011 Results: 45 patients had -a3.7 single gene deletion. In patients with -a3.7 deletion, in both homozygous and heterozygous states, MCH was lower than normal ranges. However, the percent of HbA2 was in normal range. In this study, other common deletional mutations, including - (a)20.5, -a4.2 and —MED were not found. Conclusion: The results of persent study showed that the frequency of -a3.7 single gene deletion among patients with microcytic hypochromic anemia in Kermanshah province was 48.9%. Key words: alpha thalassemia, deletional mutations, Kermanshah, GAP PCR, microcytic hypochromic anemia