القا رسيدگي جنسي در تخمك تاس ماهي ايراني (Acipenser persicus) با استفاده از محيط كشت مصنوعي (محلول رينگر معمولي)

In Vitro oocyte maturation method for selection of breeders in Persian sturgeon (Using RM1)

از مسايل مهم براي تكثير مصنوعي ماهيان خاوياري، انتخاب مولدين قادر به توليد گامت هاي رسيده با كيفيت بالا، پس از تحريك هورموني است. در اين تحقيق به بررسي توانايي فوليكولهاي تاس ماهي ايراني به صورت القا GVBD در شرايط in vitro و در محيط كشت RM1پرداخته شده است تا با مقايسه توانايي فوليكول ها جهت القا GVBD در in vitro، با توانايي فوليكولها در شرايط in vivo ، شاخص مناسبي براي انتخاب مولدين مناسب ارايه شود. براي اين منظور از 9 قطعه مولد ماده تاس ماهي ايراني (Acipenser persicus) در مجتمع تكثير و پرورش ماهيان خاوياري شهيد مرجاني گرگان، استفاده شد. هورمون پروژسترون درست قبل از كشت تخمك ها در in vitro به محيط كشت افزوده شد. نمونه‌گيري تخمك جهت كشت در in vitro و بررسي GVBD، قبل از عمل تزريق هورموني جهت القا تخم ريزي انجام شد. نمونه‌گيري از محيط كشت بعد از كشت تخمك‌ها، در 6 مرحله و هر 6 ساعت يكبار صورت گرفت. وقوع يا عدم وقوع GVBD در تخمكها بررسي و براي گروه شاهد و نمونه هايي كه GVBD در آنها روي نداده بود، ميزان شاخص قطبيت هسته (PI) محاسبه شد. بررسي روند رسيدگي در محيط كشت نشان مي‌دهد كه شاخص قطبيت هسته (PI) در تخمك‌هاي چهار مولد در زمان نمونه‌برداري دوم به صفر رسيد و تا زمان نمونه برداري سوم GVBD رخ داد. شاخص قطبيت هسته در تخمك‌هاي دو مولد نيز شانزده ساعت پس از كشت به صفر رسيد. تا زمان نمونه برداري بعدي در اكثر تخمك‌ها، GVBD رخ داده بود. بررسي نتايج حاصله در محيط in vivo مورد تاس ماهي ايراني نشان داد كه از 9 مولد، تخمكهاي هفت مولد اووله شده اند. در تخمكهاي مولدين اخير در محيط in vitro نيز تا زمان سوم نمونه برداري، GVBD رخ داده بود. نتايج حاصل از اين تحقيق نشان داد كه روش بررسي رسيدگي نهايي تخمك بصورت in vitro براي انتخاب مولدين ماده تاس ماهي ايراني نسبت به روش تعيين شاخص قطبيت هسته، توانايي بيشتري در تشخيص مولدين ماده آماده تخمكشي دارد.

One of the important problems for the sturgeon artificial reproduction is the selection of breeders able to produce high quality mature gametes after the hormonal stimulation. In this study, in vitro oocyte maturation using RM1 was considered. The intention was introducing a suitable index for choosing the breeders in order to compare follicle ability to be induced in in vitro GVBD with their ability in in vivo condition. To do this, 9 Persian sturgeon were studied in Shahid Marjani sturgeon propagation center. Right before oocyte cultivation, progesterone was added to culture medium. Oocyte sampling for cultivating in in vitro, and GVBD consideration was done before hormonal injection. Sampling from culture medium after oocyte cultivation was done every 6 hours in 6 stages. GVBD occurrence in oocytos was considered. In samples in which GVBD didnʹt occur and in controls, polarization index (PI) was calculated. Considering maturation procedure in culture medium indicated PI in 4 breedersʹ oocytes in the second sampling stage got zero; GVBD occurred in the third stage. PI in oocytes of another two breeders got zero after 16 hours. In the moat of oocytes, GVBD had occurred up to the next sampling time. The result of in vivo study showed oocytes of 7 breeders out of 9 ones got ovulated. GVBD occurred in oocytes of thses 7 breeders in in vitro study up to the third sampling stage. The result showed in vitro oocyte maturation method is dutiable PI determination method for selection of breeders.