ارزش روش هاي مختلف تشخيص هيداتيدوزيس در نشخواركنندگان بزرگ

Comparison of the validity of different diagnostic methods in determining hydatidosis in larg ruminants

بيماري هيداتيدوز ناشي از رشد متاسستود Echinococcus granulosus در اندام هاي مختلف بدن ميزبان هاي واسط است كه انتشار جهاني دارد. ايران در گروه مناطق هيپراندميك هيداتيدوزيس مي با شد. براين اساس ارزيابي واكنش آنتي ژني در مجاورت با آنتي سرم تهيه شده از گاو (256راس) و گاوميش (132راس) در مقايسه با يافته هاي كشتارگاهي و مولكولي انجام شد. آنتي ژن محلول از تغليظ مايع كيست هيداتيد و سونيكه كردن پروتواسكولكس ها تهيه شد. سرم ضدمايع كيست و پروتواسكولكس از ايمن سازي خرگوش تهيه گرديد. استخراج DNA از پرتواسكولكس انجام شد و قطعه bp688 از ژن nda1 تكثير گرديد. در مشاهدات كشتارگاهي، 4/18درصد گاوها و 3/8درصد گاوميش ها آلوده به كيست هيداتيد در كبد و ريه بودند. در صورتي كه موارد مثبت آلودگي در روش مولكولي براي گاو 1/26درصد و براي گاوميش 3/14درصد بود. در روش دات اليزا موارد مثبت آلودگي براي گاو 7/22درصد و گاوميش 8/11درصد بود. در مقايسه با يافته هاي كشتارگاهي، حساسيت و ويژگي آزمون دات اليزا براي نمونه سرم هاي گاوي، به ترتيب، 01/81درصد و 95درصد بود. در حالي كه حساسيت و ويژگي آزمون براي نمونه سرم هاي گاوميش 12/77درصد و 32/96درصد تعيين گرديد. در گاوميش، ارزش تشخيصي روش مولكولي با حساسيت 2/91درصد و ويژگي 99درصد بود. در حاليكه حساسيت و ويژگي تشخيص مولكولي كيست هيداتيد گاو به ترتيب 4/97درصد و 4/99 درصد بود. مقايسه يافته هاي آزمون سرمي به روش دات اليزا با روش تشخيص مولكولي نشان داد كه حساسيت و ويژگي آزمون دات اليزا كمتر مي باشد ولي اختلاف آماري معني داري وجود نداشت (05/0 > P). با توجه به نتايج بدست آمده در اين مطالعه، تكنيك دات اليزا مي تواند به عنوان يك روش غربالگري كيست هيداتيد براي نمونه هاي سرمي گاو و گاوميش توصيه گردد.

Hydatidosis is caused by the larval stage (metacestode) of the tapeworm Echinococcus granulosus. The disease has a worldwide distribution and Iran is in the hyperendemic region. In the present study, the efficacy of Dot-ELISA and PCR tests for detecting hydatid cysts was investigated. Blood samples and samples from liver and lung were collected from a number of 256 cattle and 132 water buffaloes. Soluble antigen was obtained from hydatid cyst fluids (HCFs) and protoscolices (Px) using concentration and sonication procedures. Anti HCFs and Px were provided from rabbits immunized with soluble antigens. For molecular analysis, DNA was extracted from tissue samples and a 688 bp fragment of nda1 gene was amplified. Necropsy findings indicated that lung and liver hydatid cyst infection was 18.4% for cattle and 8.3% for water buffaloes. Results of Dot-ELISA test showed that 22.7% of cattle and 11.8% of water buffaloes were seropositive for hydatid cysts. Infection rate using molecular detection were 26.1% in cattle and 14.3% in water buffaloes. Using necropsy findings as gold standard test, sensitivity and specificity of Dot-ELISA was 81.01% and 95% for cattle, respectively. Whereas sensitivity and specificity was 77.12% and 96.32% for water buffaloes. Sensitivity and specifity of PCR test was 97.4% and 99.4% for examined cattle while these indexes were 91.2% and 99% for examined water buffaloes. Data analysis showed that there is no significant difference between these two technique (P < 0.05). Based on result of this study, Dot-ELISA technique can be considered as one of the useful methods in the screening of hydatid cyst in cattle and water buffalo.