شناسايي گونه هاي ويبريو پروبيوتيك عليه ويبريوهاي بيماري زا در ماهي قزل آلاي رنگين كمان

Identification of probiotic vibrios against pathogenic vibrios in rainbow trout

تعداد 116 نمونه از ماهي هاي دريايي و رسوبات ساحلي سواحل خليج فارس در بوشهر تهيه شد تا با كشت بر روي محيط تي سي بي اس ويبريوهاي موجود جداسازي شوند. پس از انجام آزمايش هاي بيوشيميايي، 30 گونه ويبريو جدا گرديد كه در نهايت 7 گونه Vibrioشامل Vibrio anguillarum، V. alginalyticus، V. harveyi، V. vulnificus، V. ordalii، V. Carchariae و V. splendidus شناسايي گرديدند. پاتوژنيستي گونه هاي جدا شده مورد ارزيابي قرار گرفت و مشخص گرديد گونه هاي وV. vulnificus، V. anguillarum و V. ordaliiاز بيماريزايي شديدي براي ماهي قزل آلاي رنگين كمان برخوردار هستند. خواص آنتاگونيستي اين گونه ها بر يكديگر با روش استفاده از مايع بالايي كشت و همچنين روش آگار دو لايه انجام گرفت و نشان داد تعدادي از اين ويبريوها اثر بازدارندگي بر ديگر گونه ها دارند. سه گونه، V. alginalyticus، V. splendidus و V.harveyiبطور جداگانه با غذاي ماهي ها به مدت 14 روز به مقدار 109-107 استفاده شد و ماهي ها با ويبريوهاي بيماري زا بروش غوطه‌ورسازي مورد چالش قرار گرفتند. در حاليكه ميزان بقا در گروه كنترل 3/53-6/46 درصد بود، ماهي هايي كه از پروبيوتيك استفاده نمودند داراي درصد بقا 6/96-3/93 بودند كه به طور معني داري با گروه كنترل متفاوت بود (05/0 > P). گونه هاي پروبيوتيكي مورد مطالعه در اين تحقيق توانستند باعث تحريك سيستم ايمني غيراختصاصي ماهي از جمله افزايش فعاليت فاگوسيتوزي و شاخص فاگوسيتوزي ماكروفاژهاي كليه و انفجار تنفسي نوتروفيل هاي ماهي قزل آلاي رنگين كمان شوند.

A total of 116 marine fishes and sediments were collected from Persian gulf shore near Bushehr in order to isolate vibrio species. After culturing on thiosulphate- cirate- bile salts- sucrose and with biochemical tests, 30 isolates showed vibrio characteristics which were categorized in 7 vibrio species, V. anguillarum, V. alginalyticus, V. harveyi, V. vulnfiicus, V. ordalii, V. carchariae and V. splendidus. In pathogenicity evaluation of vibrio isolates for rainbow trout(Oncorhynchus mykiss, Walbaum), V .vulnificus, V. angillarum and V. ordalii resembled the most pathogens. Antigonistic effects of the isolates were determined using supernatant assay and double-agar layer method. Three isolates, V. alginolyticus, V. splendidus and V. haveyi were separately incorporated into the feed and fed to rainbow trouts for 14 days at doses equivalent to 107-109 cells g-1 of feed and fish were challenged with pathogenic vibrios. Whereas the untreated controls experienced survival rate of 46.6-53.3% when challenged by immersion with V. vulnificus V. anguillarum and V. ordalii, the probiotic treated groups remained healthy with a high survival rate of 93.3-96.6%. The probiotic vibrio species studied in this research reflected stimulation of innate immunity, namely enhanced phagocytic activity and phagocytic index of kidney macrophages and respiratory burst activity of neutrophils.