بررسي تنوع ژنتيكي جايگاه ژن DGAT1 و ميزان ارتباط آن با توليد شير در جمعيت گاو هاي هلشتاين ايران

Genetic Variation of DGAT1 Gene and its Association with Milk Production in Iranian Holstein Cattle Breed Population

6در سال هاي اخير در طرح هاي نقشه يابي QTL مشخص شده است كه يك ژن كانديد بالقوه (DGAT1) در انتهاي سانترومري كروموزوم شماره 14 براي درصد چربي و توليد شير وجود دارد. ژنDGAT1 با كد كردن آنزيم دي آسيل گليسرول اسيل ترانسفراز (DGAT) نقش اصلي را در سنتز تري گليسيريد و چربي شير دارد. ايجاد يك جهش تك نوكليوتيدي باعث تبديل گوانين به آدنين در مولكول DNA ، و منجر به جايگزيني آلانين به جاي ليزين در آنزيم DGAT مي‏گردد. وجود اين جهش اثر زيادي روي توليد و تركيب شير دارد. در اين پژوهش 398 نمونه خون از گاوهاي هلشتاين استانهاي تهران و اصفهان جمع آوري گرديد، سپس استخراج DNA با استفاده از روش نمكي انجام پذيرفت. با انجام واكنش PCR يك قطعه 411 جفت بازي از اگزون شماره 8 اين ژن تكثير گرديد. تعيين ژنوتيپ جمعيت با استفاده از تكنيك PCR-RFLP انجام شد. بر اساس نحوه برش آنزيم CfrI سه نوع ژنوتيپ KK ،KA ،AA مورد انتظار بود كه، افراد KK تيپ وحشي هستند. افراد KA داراي يك آلل جهش يافته (A) و افرادAA داراي دو آلل جهش يافته هستند. نتايج اين تحقيق نشان داد كه 36 فرد داراي ژنوتيپ KK ، 226 فرد داراي ژنوتيپ KA و 136 فرد داراي ژنوتيپ AA مي باشند. بنابراين فراواني آلل K برابر37/0 و فراواني آلل A برابر با 63/0 برآورد گرديد. همچنين ميزان اثر اين ژن روي توليد شير 305 روز در سطح1/0 درصد معني دار بدست آمد.

The results of multiple QTL mapping design in recent years indicated quantitative trait loci for milk fat percentage and milk yield traits identified in BTA14. DGAT1 gene coding diacylglycerol-acyltransferase enzyme, has a main role in the triglyceride synthesis and finally fat milk synthesis. A transition mutation in this gene results substitution of guanine by adenine in the gene causing substitution of lysine by alanine in diacylglycerol-acyltransferase enzyme. In this research, 398 blood samples were collected from the farms Tehran and Esfahan provinces. Using PCR reaction, 411 bp fragment of exon 8 DGAT1 gene was amplified. Finally, genotyping of the population was performed using RFLP- PCR technique. Three genotypes were detected. KK individuals with no mutant allele, AA individuals with two mutant alleles and KA individuals with one mutant allele. 36, 226 and 136 individuals had KK,KA and AA genotypes, respectively. Frequencies of DGAT1 alleles (K and A) were estimated 0.37 and 0.63, respectively. The effect of DGAT1 gene on milk305 trait was significant (P=0.001).