تعيين ساختار ژنتيكي جمعيت گاوماهي سرگنده (Neogobius kessleri gorlap) درياي خزر با استفاده از نشانگرهاي ريزماهواره‌اي در سواحل ايراني درياي خزر (گلستان و گيلان)

Determination of Neogobius kessleri gorlap population genetic structure in Iranian coasts of the Caspian Sea (Guilan and Golestan) by microsatellite markers

چكيده به‌منظور مطالعه ساختار ژنتيكي جمعيت‌هاي گاوماهي سرگنده (Neogobius kessleri gorlap) با استفاده از نشانگرهاي ريزماهواره‌اي، تعداد 100 نمونه ماهي از سواحل گلستان و گيلان جمع‌آوري شد. DNA ژنومي نمونه‌ها از بافت نرم باله به روش فنل- كلروفرم استخراج گرديد كه غلظت آن در كليه نمونه‌ها 50 تا 100 نانوگرم بود. واكنش PCR با استفاده از 6 جفت پرايمر ميكروستلايت انجام و محصول PCR با استفاده از ژل پلي‌آكريل‌آميد 8 درصد الكتروفورز و با نيترات نقره رنگ‌آميزي شدند. نتايج به‌دست آمده از اين بررسي نشان داد كه هر 6 جفت پرايمر ميكروستلايتي بررسي شده در گاوماهي سرگنده الگوي باندي پلي‌مورف داشتند. ميانگين تعداد آلل‌هاي مشاهده شده و موثر درسواحل گلستان به‌ترتيب 333/11 و 660/7 و در استان گيلان 200/10 و 737/5 بود. همچنين ميانگين هتروزيگوسيتي مشاهده شده و مورد انتظار به‌ترتيب 571/0 و 812/0 محاسبه شد. براساس نتايج به‌دست آمده در هر دو منطقه گيلان و گلستان و در جايگاه‌هاي مختلف ميكروستلايت به‌جز جايگاه‌هاي NG71، NG111 و NG215 در سواحل گلستان انحراف از تعادل هاردي- واينبرگ به‌دست آمد. همچنين مقدار FST بين نمونه‌هاي سواحل گلستان و گيلان 052/0 و مقدار Nm بين دو منطقه 521/4 بود. فاصله ژنتيكي و شباهت ژنتيكي بين نمونه‌هاي دو منطقه 634/0 و 366/0 بود. نتايج به‌دست آمده از تست AMOVA و مقدار FST نشان داد كه بين نمونه‌هاي دو منطقه اختلاف معني‌دار وجود دارد. بر اين اساس مي‏توان عنوان نمود كه 2 گروه ژنتيكي متفاوت از اين گونه در سواحل ايراني درياي خزر (گيلان و گلستان) وجود دارد.

Genetic diversity of Neogobius kessleri gorlap poplution was examined by 100 samples from Iranian coasts of the Caspian Sea (Guilan and Golestan). Genomic DNA was extracted from fin tissue by phenol-chlorophorm method and its concentration was 50 to 100 nanogram. PCR was performed using 6 microsatellite primers. PCR products were resolved through vertical non-denaturing 8% polyacrylamide gels electrophoresis. The amplified microsatellite loci were visualized through silver staining. The results showed that each of 6 primers were polymorphism in Neogobius kessleri gorlap. The mean of observed and effective allel number was 11.333 and 7.066 respectively in Golestan coast and 10.200 and 5.737 in Guilan coast. Also the mean of observed and expected heterozygosity was 0.571 and 0.812 respectively. It was also seen that specimens from two regions (exception locus NG71, NG111 and NG215 in Golestan coast) were not in Hardy-Weinberg Equibrium in all of the loci. Based on Analysis of Molecular Variance (AMOVA) FST was 0.052 between Golestan and Guilan coasts. Also Nm value was 4.521 between two regions. Genetic distance was 0.634 between specimens from Guilan and Golestan coasts. As result, there is a significant genetic divergence between some of samples. Therefore, two genetic group of Neogobius kessleri gorlap were identified in Iranian coasts of the Caspian Sea (Guilan and Golestan coasts).