بررسي امكان القا پلي پلوييدي در گياه ريحان (L. Ocimum basilicum) با استفاده از كلشي سين

The Study of Autotetraploidy Induction in Basil (Ocimum basilicum)by Colchicines Treatment

به منظور بررسي القا پلي پلوييدي در گياه ريحان (L. Ocimum basilicum)، دو آزمايش مستقل به صورت فاكتوريل و در قالب طرح كاملا" تصادفي با دو فاكتور غلظت كلشي سين و مدت زمان تيمار با 4 تكرار انجام شد. غلظت كلشي سين با چهار سطح (صفر، 05/0، 1/0 و 2/0 درصد) و مدت زمان تيمار در سه سطح (6، 12 و 24 ساعت) بود. در آزمايش اول تيمارهاي فوق روي بذر و در آزمايش دوم روي مريستم انتهايي اعمال شد. در آزمايش اول كليه گياهان غير از شاهد از بين رفتند. در آزمايش دوم اعمال تيمارها در مرحله 8-6 برگي با استفاده از روش آغشته نمودن نوك مريستم انتهايي توسط گلوله پنبه اي انجام شد. پس از مشاهده تغييرات ظاهري، از هر تيمار تعدادي نمونه توسط فلوسايتومتري مورد ارزيابي قرار گرفتند. همچنين مطالعات روزنه اي جهت بررسي تغييرات روزنه اي انجام شد. نتايج حاصل از بررسي‌هاي فلوسايتومتري، مورفولوژيك و روزنه اي در رابطه با القاي پلوييدي نشان داد كه غلظت تيمار تاثير معني داري بر اين فاكتور داشته است به طوري كه بيشترين ميزان احتمال پلوييدي (63/3 درصد) مربوط به غلظت 05/0 درصد كلشي سين مي باشد و زمان تيمار و اثرات متقابل تاثير معني داري بر اين فاكتور نداشتند. از طرف ديگر اثرات ساده غلظت كلشي سين و مدت زمان تيمار و اثر متقابل آنها بر درصد زنده ماني گياهان معني دار بود به طوري كه پس از تيمار شاهد (غلظت صفر) بيشترين زنده ماني (4/47) مربوط به غلظت 05/0 بود. غلظتهاي بالاتر باعث از بين رفتن درصد بالاتري از گياهان شدند. در ميان زمانهاي مختلف تيمار نيز بيشترين زنده ماني (5/60 درصد) مربوط به تيمار 12 ساعت بود. نتايج كلي نشان داد كه غلظت 05/0 درصد و مدت زمان 6 ساعت بهترين تيمار جهت القا پلوييدي در گياه ريحان مي باشند.

In order to induce autopolyploidy in basil (Ocimum basilicum) two separate experiments (seed treatment and cotton plug method on apical meristem) was conducted in a factorial experiment based on completely randomized design including colchicines concentrations (0, 0.05%, 0.1% and 0.2%) and the treatment time (6, 12 and 24 h) with four replications. On seed treatment all plants except control were perished. Morphological characteristics and flowcytometry data were used to detect and confirm polyploidization. The morphological and microscopic results showed that colchicines concentrations significantly affect autoploidy induction and the most cases (3.63%) observed on 0.05% concentration. Treatment time and interaction between concentration and time did not show a significant effect on this character. However the simple effects of concentration and treatment time were significantly different on survival percentage. Also concentration X time interaction showed a significant effect on this trait. Among the colchicines concentration levels, the second level (0.05%) showed the maximum survival percentage (47.7%) after the control. Higher concentrations caused more death in plants. Also the highest survival percentage (60.5%) appears in 12h duration of treatment. Generally, the best results to induce polyploidy obtained in 0.05% colchicines concentration for six hours when the treatment was treated using cotton plug.