بررسي آلودگي به Toxoplasma gondii در حيوانات مختلف در شهرستان اروميه به روش PCR و بررسي اختلاف ژنتيكي از طريق RFLP

Investigation on Toxoplasma gondii infection in domestic animals in Urmia by PCR and RFLP

آلودگي به تك ياخته انگلي T.gondii در انسان و حيوانات خونگرم در سراسر دنيا وجود دارد. اين تك ياخته مي تواند در جنين در حال رشد، موارد نقص سيستم ايمني مانند مبتلايان به ايدز و افرادي مبتلا به سرطان كه تحت درمان شيمي درماني قرار مي گيرند، شيوع يابد. در بين حيوانات اهلي گوسفند و بز به شكل گسترده به T.gondii آلوده مي شوند. اين انگل موجب سقط جنين در گله هاي گوسفند و بز و ايجاد خسارات اقتصادي مهم مي گردد. در اين بررسي از روش واكنش زنجيره اي پلي مراز(PCR) به منظور تشخيص آلودگي به T.gondii با استفاده از ژن B1 استفاده گرديد. اين ژن در هر شش سويه توكسوپلاسما كه تا به حال مشخص شده اند، وجود دارد. نمونه هاي خون در اين بررسي از 372 حيوان شامل(144 نمونه قلاده سگ، 7 قلاده گربه، 126 راس اسب، 50 راس گاو و 45 راس گوسفند) در شهرستان اروميه اخذ گرديد. در اين بررسي از روش Fuents و همكاران 1996 استفاده گرديد. بعد از رديابي محصولات PCR مشخص گرديد كه 3 نمونه آلوده به T.gondii در بين نمونه هاي اخذ شده وجود دارد. (2 نمونه اسب و يك نمونه گوسفند). نمونه هاي مثبت تحت هضم آنزيمي با آنزيم محدود كننده SacI قرار گرفتند كه الگوي برش بعد از هضم آنزيمي محصول PCR كاملا مشابه بود. اين نتايج نشان مي دهد كه سويه هاي مشابه از T.gondii مي توانند باعث آلودگي در گوسفند و اسب گردند.

Infection by the protozoan parasite Toxoplasma gondii, is widespread in humans and many other species of warm-blooded animals. It can cause significant morbidity and mortality in the developing fetus and in immunocompromised individuals, including humans with Acquired Immunodeficiency Syndrome - AIDS or submitted to cancer chemotherapy. Among livestock, sheep and goat are more widely infected with T. gondii. This parasite is a major cause of abortion, with significant economic losses to sheep and goat breeders. We applied the polymerase chain reaction for detection of the pathogenic protozoan T. gondii based on its B1 gene. The B1 gene is present and conserved in all six T. gondii strains identified to date. For this purpose blood samples were collected from a total of 372 animals (144 dog, 7 cat, 126 horse, 50 cattle and 45 sheep) from Urmia region. In this study, PCR was performed using the previously described primers (Fuentes et al., 1996)(10), which were designed to detect the B1 gene of T. gondii. The targeted B1 gene is highly conserved in all T. gondii strains and is multiple copy genes within the T. gondii genome. The method used for the characterization of T. gondii strains implied digestion with SacI restriction enzyme of the fragments amplified. The results indicated 3 positive samples (2 horse and 1 sheep samples). The 194 bp fragment was generated in all positive samples tested and one RFLP patterns were obtained. The results indicated that the same strain of T. gondii has been infected sheep and horse in the study region.