مقايسه روش رنگ آميزي H&E با روش IHC در شمارش لنفوسيتهاي اينترا اپيتليال نمونه هاي بيوپسي ديودنوم

A Comparison of H&E Staining and IHC Study in Quantization of Duodenal Intra-Epithelial Lymphocytes

بحث و نتيجه گيري: براي آناليز لنفوسيتهاي اينترا اپيتليال دو مرحله محاسبه لنفوسيتها با استفاده از رنگ آميزي H&E ، رنگ آميزي LCA و شمارش لنفوستها با اين روش در موارديكه پژوهشگر موارد مشكوك مواجه مي شود ( موارد با لنفوسيتهاي اينترا اپي تليال نرمال اما نزديك به نقطه cut – off point ) پيشنهاد مي گردد. چنانچه در مواردي به هر دليل رنگ آميزي IHC انجام نشود ميتوان از فرمول زير استفاده كرد: IELs on H&E + 5 IELs on IHC. مواد و روش‌ها: اين مطالعه بصورت مقايسه اي و بر روي 74 نمونه بيوپسي ديودنوم از فروردين تا شهريور ماه سال 1383 در بيمارستان دكتر شريعتي تهران انجام پذيرفت. در اين پژوهش همه لنفوسيتهاي اينترااپي تليال به روش يكسوكور مورد بررسي قرار گرفتند.. يافته‌ها: ميانگين تعداد لنفوسيتهاي اينترا اپيتليال به ازاي يكصد سلول اپيتليال در مشاهده اول و دوم به ترتيب 77/15 و 72/16 براي نمونه هاي رنگ شده به روش H&E و 54/21 و 18/21 براي موارد رنگ شده به شيوه IHC محاسبه گرديد. مقايسه ميانگين لنفوسيتهاي اينترا اپي تليال در لامهاي رنگ شده به روش H&E و LCA نشان داد كه LCAدر نشان دادن لنفوسيتها حدودا" پنج سلول بر H&E برتري دارد. مقدمه : : از بيوپسي هاي ديودنوم بعنوان ابزاري براي غربالگري افراد مشكوك به بيماري سلياك استفاده ميشود. براي تشخيص اين بيماري ، افزايش تعداد لنفوسيتهاي اينترااپيتليال (IELs) حتي در موارديكه ساختمان پرزهاي روده اي طبيعي است مهم بوده و مي تواند دليلي بر عدم تحمل به گلوتن باشد. هدف از اين مطالعه مقايسه دو روش مختلف رنگ آميزي بافتي H&Eو IHC براي اندازه گيري لنفوسيتهاي اينترااپيتليال در بيوپسي هاي ديودنوم است

Background: Duodenal biopsies are routinely obtained from suspected patients as a screening tool to evaluate the possibility of celiac diseases (CD). An increase in Intra-Epithelial Lymphocytes (IELs) is important in the diagnosis of CD and even in the presence of normal villous architecture may reflect gluten intolerance. The aim of this study was the comparison of two different histological staining Methods (H&E and IHC) for the quantization of duodenal IELs. Materials and methods: This cross–sectional study was performed on 74 duodenal samples from April 2004 to September 2004 at Shariati hospital. All biopsies were stained with H&E and IHC Methods (LCA) and each one was twice examined for the quantization of IELs by pathologist taking use of single blinding. Results: The mean number of IELs/100 epithelial cells in the first and second observations was 15.77 and 16.72 on H&E stained sections whereas it was 21.54 and 21.18 on IHC study. There was a linear correlation between IELs in H&E and IHC Methods. The comparison of mean IELs on H&E and LCA stained slides revealed about 5 cells preference for LCA. Conclusion: Two-step analysis of IELs quantization was suggested: 1) Estimation of IELs on H&E stained sections, and 2) LCA staining and counting, if IELs are suspected (upper limit of normal). When IHC staining was not performed it was possible to use the following formula: IELs on H&E +5 IELs on IHC