مقايسه چند شكلي در ژن مبدل سيگنال و فعال كننده نسخه برداري (STAT5A) در گاو هاي نژاد هلشتاين و سيمنتال

Comparison of polymorphism of STAT5A gene in Simmental and Holstein cows

مبدل سيگنال و فعال كننده نسخه برداري (STAT5A) يك پروتيين سيگنالي كليدي است كه فعاليت بيولوژيك هورمون پرولاكتين را ميانجيگري مي‌كند و سبب فعال شدن نسخه‌برداري ژن هاي پروتيين شير مي شود. در اين تحقيق، به منظور شناسايي چند شكلي ژن STAT5A از 100 راس گاو نژاد هلشتاين و سيمنتال خون گيري شد. استخراج DNA به روش نمكي بهينه يافته و تكثير يك قطعه 281 جفت بازي از بخشي از اينترون 15 و اگزون 16 اين ژن توسط واكنش زنجيره اي پلي مراز (PCR) با استفاده از يك جفت آغازگر اختصاصي صورت گرفت. ژنوتيپ هر نمونه با استفاده از روش SSCP و رنگ آميزي نيترات نقره تعيين شد. براي اين ژن در جايگاه مورد مطالعه دو الگوي باندي Aو B با فراواني 91 و 9 درصد در گاوهاي هلشتاين، 88 و 12درصد در گاوهاي سيمنتال شناسايي شد. در اين مطالعه دو ژنوتيپ AAبا فراواني 82/0، 76/0 و ژنوتيپ AB با فراواني 18/0 و 24/0 به ترتيب در گاوهاي هلشتاين و سيمنتال مشاهده شد. نتايج اين مطالعه نشان داد كه اين ناحيه از ژنوم در گاوهاي مورد مطالعه چند شكل بوده و تكنيك SSCP توانايي شناسايي چند شكلي ها را دارد. علاوه بر اين، در مطالعه حاضر مقايسه فراواني هاي آللي و ژنوتيپي بين نمونه هاي تعيين ژنوتيپ شده در گاوهاي نژاد هلشتاين و سمينتال اختلاف آماري معني داري نشان نداد.

Signal transducer and activator of transcription 5A(STAT5A) is a crucial signaling protein mediating the biological effects of prolactin hormone which in turn activates the transcription of milk proteins genes. In order to study the polymorphisms of STAT5A gene total blood samples were collected randomly from one hundred of Holstein and Simmental cattle. DNA was extracted using modified salting out method and polymerase chain reactions (PCR) were carried out using a specific primer pairs for amplification a fragment of 281 bp from part of exon 15 and intron 16 of STAT5A gene. All of individuals were genotyped by single stranded conformation polymorphism (SSCP) analyses using silver staining. Two SSCP patterns of A and B were identified with the frequency of 0.91 and 0.09 and 0.88 and 0.12 in Holstein and Simmental cattle, respectively. Two genotypes of AA (0.82) and AB (0.18) were found in Holstein and AA (0.76) and AB (0.24) in Simmental individuals. The results revealed that the marker site of STAT5A gene is polymorph in studied Holstein and Simmental cattle and the SSCP technique has a great potential for detection of such polymorphism. Furthermore, a comparison of gene and genotype frequencies showed no any statistical differences (P > 0.05) between Holstein and Simmental cattle breed that have genotyped in the present study.