مقايسه دو روش ELISA و HPLC در تعيين آفلاتوكسين B1و اكراتوكسين A درفلفل قرمز ايراني

A comparison between ELISA and HPLC for aflatoxin B1 and ochratoxin A detection in Iranian red pepper

هدف از انجام اين مطالعه، مقايسه دو روش كروماتوگرافي مايع با عملكرد بالا (HPLC) و الايزا (ELISA) در اندازه گيري آفلاتوكسين B1 (AFB1) و اكراتوكسين A (OTA) در ادويه فلفل قرمز مي باشد. براي اين منظور، 36 نمونه فلفل قرمز از سطح مزرعه در شهرستان سبزوار (در استان خراسان رضوي) جمع آوري گرديد و در برابر نور خورشيد و هواي آزاد خشك شد. در ميان مجموع 36 نمونه، ميزان حضور AFB1 و OTA در روش ELISA به ترتيب (28 مورد) 8/77% و (8 مورد) 2/22% و در محدوده 15-1/1 ميكروگرم بر كيلوگرم و 35/2-59/0 ميكروگرم بر كيلوگرم بدست آمد. در مقايسه، در روش HPLC ، AFB1 و OTA به ترتيب در 25 مورد (4/69%) و6 مورد (7/16%) از نمونه ها در محدوده 5/14-4/0 ميكروگرم بر كيلوگرم و 17/2-74/0 ميكروگرم بر كيلوگرم، شناسايي شد. از نظر آماري ارتباط خوبي بين هر دو روش در آناليز كمي AFB1 و OTA مشاهده شد ( براي AFB1 979/0= r2 و براي OTA 947/0= r2 ) اما همبستگي بدست آمده در اندازه گيري AFB1 دقيقتر و بالاتر از OTA بود. از طرف ديگر ميزان AFB1 و OTA تعيين شده توسط ELISA بالاتر از ميزان بدست آمده توسط HPLC حاصل شد. نتايج نشان داد كه روش ELISA مي تواند به عنوان يك روش غربالگري براي تعيين حضور AFB1 و OTA در پودر فلفل قرمز استفاده شود اما نتايج بدست آمده توسط اين روش بايد توسط روش HPLC تاييد گردد.

The aim of this study was to compare high performance liquid chromatography (HPLC) and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) methods for aflatoxin B1 (AFB1) and ochratoxin A (OTA) determination in red pepper spice. For this purpose, thirty six samples of red pepper were collected from farm in Sabzevar (a city in Razavi Khorasan province) and dried in the sun and open air. Among a total of 36 samples, the incidence of AFB1 and OTA was (28) 77.8% and (8) 22.2% within the range of 1.1-15.0 ?g/kg and 0.59-2.35 ?g/kg, respectively, as it was determined by ELISA. In comparison, HPLC detected AFB1 and OTA in 25 (69.4%) and 6 (16.7%) of samples within the range of 0.4-14.5 ?g/kg and 0.74-2.17 ?g/kg, respectively. Statistically, comparison of the quantitative analysis of AFB1 and OTA by ELISA and HPLC revealed a good correlation (for AFB1 r2 = 0.979, for OTA r2 = 0.947( between both methods but correlation obtained for AFB1 was more accurate and higher than OTA. On the other hand, the levels of AFB1 and OTA determined by ELISA were higher than those determined by HPLC. According to the obtained results, ELISA can be used as a reliable screening method, but the confirmation of positive results must be done by HPLC method.