ميزان بلوغ و لقاح آزمايشگاهي تخمك ژرمينال وزيكول همراه يا بدون سلول كومولوس پس از انجماد شيشه‌اي در موش نژاد BDF1

Assessment of in vitro Maturation and Fertilization of BDF1 Mice Germinal Vesicle Oocytes with and without Cumulus Cell after Vitrification

مقدمه: بهبود ميزان حاملگي با استفاده از روش‏هاي انجمادي تخمك‏ها به عنوان عاملي مهم، به پيشرفت فناوري باروري آزمايشگاهي (ART) Assisted Reproductive Technology كمك مي كند. انجماد شيشه اي يك روند فيزيكي است كه در طي آن محلول غليظ ضديخ پس از قرار گرفتن در سرماي زياد بدون تشكيل كريستال يخ در سلول‏هاي زنده به حالت شيشه‏اي تبديل مي شود. هدف: ارزيابي زنده ماندن، بلوغ آزمايشگاهي و بدنبال آن قدرت تكوين تخمك مرحله ژرمينال وزيكول(GV) پس از انجماد شيشه‏اي يك و چند مرحله‏اي مواد و روش‏ها: تخمك مرحله ي ژرمينال وزيكول با و بدون سلول‌هاي كومولوس در محلول انجماد شيشه اي شامل 30 درصد(V/V) اتيلن‌گليكول، 18 درصد(W/V) فايكول 70و 3/0 مولار به روش يك وچند مرحله‏اي منجمد شدند. پس از انجماد و قرار دادن در داخل نيتروژن مايع، تخمك ها ذوب و دو مرتبه در داخل محيط كشت شستشو داده شدند. ميزان زنده ماندن تخمك‌ها، بلوغ تخمك و رسيدن آن به مرحله متافاز 2، لقاح و تكوين جنين به مرحله‏ي دو سلولي بعد از انجماد- ذوب درخارج بدن(In vitro) مورد بررسي قرار گرفت. نتايج: ميزان زنده ماندن، بلوغ تخمك به مرحله متافاز 2، لقاح و ميزان تشكيل جنين دو سلولي در روش انجماد شيشسه‏اي چند مرحله‏اي به طور معني‌دار (P < 0.05) نسبت به روش انجماد شيشه‏اي يك مرحله‏اي بالاتر بود. نتيجه‌گيري: تخمك‏هاي مرحله‏ي ژرمينال وزيكول منجمد شده با سلول‏هاي كومولوس و همچنين روش انجماد شيشه‏اي چند مرحله‏اي نسبت به تخمك مرحله‏ي ژرمينال وزيكول بدون سلول‏هاي كومولوس و روش انجماد شيشه‏اي يك مرحله‏اي اثر مثبتي بر ميزان بلوغ(Maturation rate) و ميزان تكوين جنين(Development rate)