تشخيص سريع سل به روش ايمونودات با استفاده از آنتي ژن 38 كيلودالتوني مايكوباكتريوم توبركولوزيس

Rapid screening of Tuberculosis with Immunodot Technic using the 38 KD antigen of Mycobacterium Tuberculosis

زمينه و هدف : سل يك بيماري عفوني با انتشار جهاني است. بر طبق آخرين آمار سازمان بهداشت جهاني حدود يك سوم جمعيت جهان به مايكوباكتريوم توبركولوزيس آلوده مي‌باشند. در حال حاضر كماكان روشهاي سنتي باكتريولوژيك تنها روشهاي تشخيص سل در مراكز بهداشتي مي باشند. از مهمترين اهداف برنامه جهاني مبارزه با سل ابداع روشي آسان و قابل اطمينان جهت تشخيص سل است. از جمله روشهاي بالقوه اي كه ارزش جايگزين شدن به جاي روشهاي باكتريولوژيك را دارند، روشهايي هستند كه بر اساس تعيين پاسخ آنتي بادي اختصاصي عليه آنتي ژنهاي مايكوباكتريايي بنا نهاده شده‌اند و اين روش بنا به چند دليل بيش از بقيه روشها مورد توجه محققين بوده است. اول اينكه پاسخ آنتي بادي قوي عليه آنتي ژنهاي مايكوباكتريايي فقط در طي سل فعال مشاهده مي‌شوند. ثانياً، روشهاي سرولوژيك، ساده، سريع، ارزان و نسبتاً غير تهاجمي هستند. ثالثاً، اين روشها بر خلاف آزمون جلدي PPD توان افتراق بين يك آلودگي بدون علامت و بيماري فعال را دارا مي باشند. در اين پژوهش يك آزمون غربالگري جهت تشخيص سل به روش ايمونودات با استفاده از يك آنتي ژن ترشحي گليكوپروتييني مايكوباكتريوم توبركولوزيس به نام آنتي ژن 38 كيلودالتوني مورد استفاده قرار گرفت، زيرا در پژوهشهاي قبلي، از اين آنتي ژن به عنوان يك آنتي ژن اختصاصي گونه كه در آزمونهاي سرولوژيك ويژگي زيادي از خود نشان داده است ياد شده است. روش بررسي: در اين مطالعه نتايج آزمايش ايمونودات بر روي سرم 32 بيمار مبتلا به سل ريوي اسمير مثبت با نتايج آزمايش سرم 32 فرد سالم به عنوان كنترل مقايسه شد و سپس نتايج آن با نتايج آزمون مشابه با مخلوط پروتييني فيلتراي كشت مورد مقايسه قرار گرفت. يافته‌ها: با استفاده از آنتي ژن 38 كيلودالتوني آزمايش بر روي 32 بيمار منتهي به 29 پاسخ مثبت گرديد، در حاليكه با استفاده از مخلوط پروتيين در هر 2 نمونه سرم هيچ پاسخ مثبتي در سرمهاي گروه كنترل مشاهده نشد، ولي با استفاده از مخلوط پروتيين فيلتراي كشت، در 8 نمونه از سرمهاي گروه كنترل نيز پاسخ مثبت مشاهده شد(ويژگي انجام آزمون ايمونودات با استفاده از آنتي ژنهاي 38 كيلودالتوني و مخلوط پروتيين، به ترتيب 100 و 75 درصد محاسبه شد). بحث و نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه بخوبي بيانگر اين نكته است كه استفاده از انتي ژن 38 كيلودالتوني در تشخيص سريع توبركولوزيس به روش ايمونودات بدليل ويژگي بالاي آن و عدم نياز به تجهيزات پيشرفته و گرانقيمت ميتواند بعنوان يك آزمون كارا، دقيق و آسان در مطالعات ميداني مورد استفاده قرار گيرد.

Background and Aim: Tuberculosis is an infectious disease with worldwide distribution. Based on WHO report one third of people are affected with mycobacterium tuberculosis. Today, the traditional bacteriological methods are only available using diagnostic methods for detection of tuberculosis. Innovation of a simple and efficient method for the diagnosis of tuberculosis is one of the most important aims of the world program against tuberculosis. The methods which are based on indicating of specific antibody response against mycobacterial antigens are potentially valuable for substituting traditional methods. These methods have attracted the researchersʹ attention for some reasons. Firstly the strong antibody response against mycobacterial antigens is detected only during active tuberculosis. Secondly the serologic methods are simple rapid, cheap and noninvasive. Thirdly, these methods in contrast to cutaneous PPD test are able to differentiate between an asymptomatic contamination with mycobacterium and active disease. In this study, a secretary glycoprotein antigen of mycobacteriurn tuberculosis, named 38 kD antigen, was used for a screening test for diagnosis of tuberculosis by immunodot method, since in previous researches, this antigen was considered as a special specific one in serological tests and showed much specificity. Materials and Methods: In this study the results of immunodot tests on serum of 32 patients with pulmonary tuberculosis and positive sputum smear compared with 32 healthy people. Then, the results were compared with similar tests on protein was mixture of culture filtrate. Results : Assay by using 38 kD antigen, resulted in 29 positive response among 32 patients, whereas by using protein mixture of culture filtrate, the test resulted in positive response in all patients (sensitivities are 90.6%, and 100% respectively). On the other hand, using 38 kD antigen resulted no positive response in assay with serum from healthy ones, but by using protein mixture from culture filtrate resulted in 8 positive response in healthy people (specificities 100% and 75% respectively). Discussion and Conclusion : Results of this study showed the efficacy of using 38 kD antigen in rapid diagnosis of tuberculosis by immunodot method, because this method has more specificity and does not require sophisticated and expensive equipments. Thus this test may be used in field studies as a simple, precise and efficient test. Key words: Screening, Tuberculosis, 38 kD antigen, Mycobacteriurn tuberculosis