تاثير استفاده از پودر آنتي‌بادي اختصاصي زرده تخم‌مرغ (IgY) عليه اشرشياكلي، بر ايمني مخاطي روده و الگوي الكتروفورتيك پروتيين خون جوجه‌هاي گوشتي

Effects of Escherichia coli-specific egg yolk antibody powder on intestinal mucosal immunity and blood protein electrophoretic patterns of broiler chicks

چكيده آزمايش حاضر به منظور مطالعه اثر پودر آنتي‌بادي اختصاصي زرده تخم‌مرغ (IgY) عليه اشرشياكلي 80K:78O، بر نحوه پاسخ‌هاي ايمني مخاطي و تغييرات الگوي الكتروفورتيك خون جوجه‌هاي گوشتي آلوده با اشرشياكلي طراحي گرديد. جهت تهيه پودر آنتي بادي، تعداد 40 قطعه مرغ تخم گذار لگهورن 36 هفته، با باكتري مورد آزمون ايمونيزه گرديده و پس از جمع آوري تخم مرغ ها براي يك دوره زماني 12 هفته، IgY با بهره گيري از روش استخراج بخش محلول در آب از زرده تخم مرغ ها جداسازي و ليوفيليزه گرديد. تعداد 280 قطعه جوجه گوشتي هفت روزه به طور كاملاً تصادفي به پنج تيمار (چهار گروه آلوده شده با اشرشياكلي و يك گروه غير آلوده، به عنوان گروه كنترل منفي)، چهار تكرار و چهارده مشاهده در هر تكرار تقسيم گرديدند. در روز هفتم همه جوجه ها به جز گروه كنترل منفي با 5/0 ميلي ليتر محيط كشت حاوي CFU/ml 109 اشرشياكلي 80K:78O به روش خوراكي آلوده گرديدند. اين عمل در روزهاي 14 تا 21 با 1 ميلي ليتر از همان محيط كشت براي هر يك از جوجه‌ها انجام پذيرفت تا جمعيت اشرشياكلي مدفوع به حدود CFU/g 105 رسيد. سپس سطوح مختلف آنتي‌بادي از روز 21 تا 42، در قالب يك طرح كاملاً تصادفي به چهار گروه آلوده عرضه گرديد. چهار گروه آلوده شده با اشرشياكلي، جيره هاي با انرژي و پروتيين مشابه را كه با سطوح صفر (كنترل مثبت)، 1/0 ، 2/0 و 4/0 درصد آنتي‌بادي اختصاصي مكمل شده بودند دريافت نمودند. گروه كنترل منفي نيز جيره پايه مشابه و بدون افزودن آنتي‌بادي را دريافت كردند. نتايج بيان‌گر آن است كه چالش گوارشي جوجه‌هاي گوشتي با اشرشياكلي 80K:78O سبب گرديد تا شمارش اشرشياكلي ايليومي، غلظت IgA سرمي و مخاطي (sIgA)، غلظت‌هاي پروتيين سرمي كل وگلوبولين‌ها به طور معني‌داري افزايش يابد. پس از سه هفته مصرف سطوح مختلف آنتي‌بادي اختصاصي، جمعيت اشرشياكلي ايليومي و غلظت sIgA در گروهايي كه سطوح 2/0 و 4/0 درصد آنتي‌بادي اختصاصي را دريافت داشته بودند، به طور بسيار معني‌داري (01/0 > P) پايين‌تر از ديگر گروه‌هاي آلوده بود. حال آن كه غلظت IgA سرمي و نسبت آلبومين به گلوبولين تنها در سطوح حاشيه‌اي به ترتيب كاهش (36/0=P) و افزايش (20/0=P) يافتند. لذا يافته‌هاي حاضر اين احتمال را تقويت مي‌نمايد كه در پي مصرف سطوح بالاي آنتي‌بادي اختصاصي و كاهش غلظت واسطه‌هاي التهابي، نسبت آلبومين در سرم افزايش يافته و پروتيين‌هاي سرم به جاي آنكه در مسير‌هاي التهابي به كارگرفته شوند مي‌توانند به سوي مسيرهاي متابوليكي هدايت شده و عملكرد توليدي پرنده آلوده به عوامل پاتوژن را به نحو موثري تحت تاثير قرار دهند.

Abstract The present study aimed at the investigation of dietary supplementation of different levels of specific egg yolk antibody (IgY) powder on intestinal mucosal immunity and serum protein electrophoretic patterns of E. coli O78:K80-challenged broiler chicks. For lyophilized antibody preparation, forty 36-week-old White Leghorn hens were hyperimmunized with E. coli O78:K80 bacteria for a 12-week-period and IgY was isolated from the eggs by the water-dilution method. Seven-day-age broiler chicks were challenged orally with 0.5 mL of E. coli O78:K80 suspension (except for the negative control). The challenge was continued for additional 7 days from day 14 to 21 with 1.0 mL of a late log phase culture (109 cfu/mL) until the level of E. coli in droppings reached to 105 cfu/g. A total of 280 broiler chicks were randomly assigned to 5 dietary treatments with 4 replicates of 14 chicks each. The four challenged-groups received a basal diet supplemented with 0 (as positive control), 0.1, 0.2, or 0.4% (wt/wt) IgY. The unchallenged-group, as negative control, fed the same unsupplemented diet. Oral infection caused increase in ileal E. coli enumeration, and induced systemic and mucosal inflammatory reactions. After three weeks of feeding, the levels of 0.2 and 0.4% IgY had the most suppressive effects (P < 0.01) on the ileal E. coli enumeration and intestinal secretory IgA concentration. However, with at least 0.2% IgY, serum IgA concentration and the albumins to globulins ratio were slightly decreased (P=0.36) and increased (P=0.20), respectively. It was concluded that feeding high level of specific antibody powder, in addition to decreasing inflammatory factors, may increase the ratio of serum albumin. Therefore, the serum proteins can be directed toward metabolic pathways instead of being imposed on inflammatory pathways.