بررسي روشهاي تشخيصي يرسينيا انترو كلي تيكا

Evaluation of Yersinia enterocolitica diagnostic approaches

زمينه و هدف: يرسينيا انتروكلي تيكا يك باكتري گرم منفي است كه سويه هايي از ‌آن در ايجاد بيماري در انسان دخيل هستند . جهت افتراق انواع بيماريزاي اين باكتري از غير بيماريزا، از تستهايي از قبيل جذب كنگو رد، كريستال ويوله و تست وابستگي به كلسيم استفاده مي شود. اين تستها بر مبناي وجود پلاسميد 75-70 كيلو دالتوني است، كه به علت عدم پايداري پلاسميد گاهاً نتايج منفي كاذب حاصل مي شود. لذا راه اندازي روشي بر مبناي وجود ژنهاي كروموزومي عامل بيماريزايي كه پايدار هستند، مي تواند اين مشكل را برطرف نمايد. اين بررسي با هدف مقايسه روشهاي تشخيصي معمولي و مولكولي در شناسايي سويه هاي بيماريزاي يرسينيا انتر و كلي تيكا انجام شده است . روش بررسي: در اين بررسي از 13 سوش ميكربي شامل 3 سوش از گونه هاي شيگلا فلكسنري، سالمونلا تايفي، وپروتيوس ميرابليس و10 سوش يرسينيا آنتروكلي تيكا شامل 4 سوش از منابع محيطي آب و 5 سوش از نمونه مدفوع انساني و يك سوش كنترل استفاده گرديد. در اين بررسي جهت تشخيص سريع و دقيق يرسينيا آنتروكلي تيكا، روش PCR با هدف قراردادن ژن كروموزوميail به كار برده شده است. يافته ها: نتايج تمامي واكنشهاي بيوشيميايي مانند قابليت تخمير قند گلوكز بدون توليد گاز، حركت مثبت در 25 درجه سانتيگراد و منفي در 37 درجه سانتيگراد، اوره مثبت، ODC مثبت، ONPG مثبت، تخمير لاكتوز منفي و تستهايLDC , ADH , SH2 منفي، مويد يرسينياانتروكلي تيكا بودن سويه هاي مورد بررسي بوده است. نتايج حاصل از PCR ژنوم باكتريهاي مورد استفاده پس از ژل الكتروفورز محصولات PCR به دست آمده از سوشهاي مورد استفاده در مجموع 4 سوش يرسينيا آنتروكلي تيكا انساني، PCR مثبت داشتند . در حالي كه هيچ باندي در الكتروفورز نمونه هاي شيگلا، سالمونلا، پروتيوس و يرسينياهاي محيطي مشاهده نگرديد، علاوه بر اين با نمونه بدون DNA هيچ باندي ديده نشد كه نمايانگر عدم آلودگي است. نتيجه گيري: نتايج به دست آمده نشان داد كه اغلب سويه هاي بيماريزاي يرسينيا آنتروكلي تيكا ي انساني مورد مطالعه داراي ژن ail هستند.

Background and Aim: Yersinia enterocolitica is a Gram-negative bacterium which its strains are involved in human diseases. To differentiate among pathogenic and non–pathogenic types, tests such as Congo Red absorption, Crystal Violet, and Calcium Dependency test are used. These tests are based on existence of 70-75 kb plasmids and sometimes, with respect to plasmids instability, we will face false negative results. Therefore, by setting up a methodology based on stable chromosomal genes of pathogenic agent we can overcome this hurdle. The goal of this survey was comparison among routine and molecular diagnostic approaches in the identification of Y. enterocolitica pathogenic strains. Materials and Methods: Some Gram-negative bacteria from family Enterobacteriacea and some Y. enterocolitica strains isolated of human beings and environment were evaluated. Results: Obtained results showed that 4 Y. enterocolitica strains isolated of human beings were PCR positive while PCR results of environmental strains, one human strain and non-Yersinia strains were negative. Conclusion: The mentioned approach can be used as a method to differentiate among pathogenic and non-pathogenic strains of Y. enterocolitica. Key words : Yersinia Enterocolitica, Pathogenesis, PCR