اثر پراكسيد هيدروژن و ملاتونين بر بلوغ هسته‏اي اووسيت در شرايط برون تني

Effect of H2O2 and Melatonin on In vitro Oocyte Maturation

هدف: هدف از اين مطالعه بررسي اثر غلظت‏هاي مختلف ملاتونين در كاهش تنش اكسيداتيو ناشي از هيدروژن پراكسيد بر بلوغ هسته‏اي اووسيت‏هاي نابالغ گوسفند بود. مواد و روش‏ها: تخمدان‏ها از كشتارگاه جمع آوري و استحصال اووسيت به روش استاندارد انجام گرفت، كشت اووسيت‏ها در الف: TCM199 به علاوه 10 درصد FBS، 5 ميكرو گرم در ميلي‏ليتر FSH ، 01/0 واحد بين المللي در ميلي ليتر LH، 100 واحد بين‏المللي در ميلي‏ليتر پني سيلين و 100 واحد بين المللي در ميلي‏ليتر استرپتومايسين، ب: الف + H2O2300 ميكرو مولار با دماي 5/38 درجه سانتي‏گراد، پ: ب + 1 ميكرو مولار ملاتونين و ت: ب + 10 ميكرو مولار ملاتونين انجام شد. نتايج: اين مطالعه نشان داد كه H2O2، بلوغ هسته‏اي را بطور معني‏داري ( 05/0P < ) نسبت به گروه كنترل كاهش مي‏دهد (7/14در مقابل 9/84). ملاتونين با غلظت صفر، 1 و 10 ميكرو مولار توانست هنگام تنش اكسيداتيو ميزان اووسيت‏هايي كه به متافاز-2 مي‏رسند را افزايش دهد (به ترتيب 7/14 در مقابل 29/43 و 12/54)، اما با افزايش غلظت ملاتونين از 1 به 10 ميكرو مولار، تاثير معني‏داري روي بلوغ اووسيت‏ها نداشت. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه ملاتونين هنگام تنش اكسيداتيو بلوغ آزمايشگاهي اووسيت‏هاي گوسفند را بهبود مي‌بخشد.

Aim: The aim of this study was to determine the effect of stress oxidative (H2O2) and different concentrations of melatonin on nuclear maturation of immature oocytes in sheep. Material and Methods: Ovary collection and oocyte recovery was carried out by standard method. Oocytes culture was in the following conditions: A: TCM199+10% FBS, 5µg/ml FSH, 0.01IU/ml LH, 100 IU/ml penicillin and 100 IU/ml streptomycin, B: A + H2O2 (300 µM) at 38/5 C?, C: B + 1 µM melatonin and D: B + 10µM melatonin. Results: This study showed that H2O2 significantly (P < 0.05) decreases nuclear maturation in compare to control (14.7 vs. 84. 9). 0, 1 and 10 µM melatonin could improve oocytes to reach to metaphase-II stage (respectively 14.7 vs. 43.29, 54.12). But increasing melatonin dose from 1 to 10 µM, did not have any significant effect on oocytes maturation. Conclusion: The results of this study showed that melatonin improves sheep oocytes maturation during oxidative stress. Keywords: Stress oxidative, Melatonin, Sheep oocyte