مكان‏يابي و بررسي اثر محيط‏هاي هيپر و هيپواسموتيك بر نحوه پراكندگي آنزيم Na+, K+- ATPase در توبول‏هاي كليوي بچه ماهي هامور معمولي (Epinephelus coioides)

Localization and Effect of Hyper and Hypo-osmotic Environments on Distribution of Na+, K+- ATPase in Kidney Tubules of Juveniles of (Epinephelus coioides)

هدف: بافت‏شناسي نفرون‏هاي كليوي بچه ماهي هامور معمولي (Epinephelus coioides) و مكان‏يابي آنزيم Na+/ K+- ATPase در خلال تنظيم اسمزي و تطابق با محيط‏هاي هيپو و هايپراسموتيك ( ppt60 و 10) با استفاده از روش ايمونوهيستوشيمي. مواد و روش‏ها: به منظور بافت‏شناسي نفرون‏هاي كليوي از رنگ آميزي هماتوكسيلين- ايوزين استفاده شد. مكان‏يابي ايمن‏يايي آنزيم Na+, K+- ATPase نيز با استفاده از آنتي بادي‏هاي اوليه (IgG?5) و ثانويه FITC انجام شد. نتايج: مطالعات بافت‏شناسي نشان داد نفرون‏هاي كليوي بچه ماهي هامور معمولي شامل جسمك كليوي، قطعه گردني، توبول پروكسيمال اوليه و ثانويه، توبول ديستال و جمع كننده مي باشند. نتايج مطالعات ايمونوهيستوشيميايي نيز نشان داد كه در تيمار كنترل آنزيم مذكور در سمت قاعده‏اي- جانبي سلول‏هاي اپيتليال توبول‏هاي كليوي بچه ماهي هامور حضور داشته اما در گلومرول‏ها حضور ندارد. در محيط‏هاي هيپواسموتيك و هيپراسموتيك نيز به مانند تيمار كنترل آنزيم در سمت قاعده‏اي- جانبي سلول‏هاي اپيتليال توبول‏ها حضور دارد اما در ساختار گلومرول‏ها حضور ندارد. نتيجه گيري: با توجه به اطلاعات بدست آمده در اين تحقيق مي‏توان به اين نتيجه رسيد كه ساختار نفرون‏ها در كليه ماهي هامور معمولي شبيه ساختار آن در ساير گونه‏هاي ماهيان يوري هالين مي باشد. همچنين، حضور آنزيم در سمت قاعده‏اي- جانبي سلول‏هاي اپيتليال كليوي نشان‏دهنده حضور فعال اين آنزيم در فرايند تنظيم اسمزي مي‏باشد.

Aim: Histological study of kidney nephrons of Epinephelus coioides Juveniles and Immunolocalization of Na+, K+- ATPase during osmoregulation and adaptation with hypo- and hyper-osmotic (10 and 60 ppt) conditions. Material and Methods: H & E staining and IgG?5 and FITC as primary and secondary antibodies were used for kidney nephrons histological studies and Immunolocalization of Na+, K+- ATPase, respectively. Results: Results of microscopic study indicated that kidney nephrons of juvenile grouper were consisted of Glomerulus, Neck segment, Proximal, Distal and Collecting tubules. Immunolocalization of control group showed that Na+, K+- ATPase was distributed in all part of nephron structure but glomeruli. In hypo- and hyper-osmotic environments similar to control condition the enzyme distributed into the epithelial cells of proximal, distal and convoluted tubules but was not presence in glomeruli. Conclusion: The results of present study indicated that, the structure of kidney nephrons of E. coioides was similarto that of other euryhaline species and presence of Na+, K+- ATPase in basolaterl portion of cell membrane indicated its active role in osmotic and ionic regulation in kidney. Key words: Grouper, Kidney Tubules, Histology, Na+ K+- ATPase, Immunolocalization, Osmoregulation