ارزيابي فرآيند تكثيرسلولي فوليكولهاي تخمدان با استفاده از تكنيك ايمونوهيستوشيمي PCNA در رت هاي هيپوتيروييد

Evaluation of the Cell Proliferation Process of Ovarian Follicles in Hypothyroid Rats by Proliferation Cell Nuclear Antigen Immunohistochemical Technique

مقدمه و هدف: عملكرد تناسلي طبيعي درزنان ، نيازمند پيام هاي هورموني هيپوتالاموسي ، هيپوفيزي وتخمداني است . كاهش توليد وترشح هورمون هاي تيروييدي مشخصه هيپوتيروييدي اوليه مي باشد.طي مراحل رشد فوليكولار ، كمپلكس PCNA (Proliferation Cell Nuclear Antigen) و سيكلين D نقش مهمي درتنظيم فرآيند تكثير سلولي درفوليكولهاي تخمدان ايفامي كند. هدف ازاين مطالعه تعيين شاخص تكثير سلولي ناشي ازكاهش هورمونهاي تيروييدي وچگونگي تغييرات اين فرآيند درفوليكولهاي تخمدان رت مي باشد. روش كار : دراين مطالعه تجربي تعداد 20 سرموش صحرايي ماده نژاد ويستاربه دوگروه تجربي وكنترل تقسيم شدند.گروه تجربي بااستفاده ازداروي پروپيل تيواوراسيل (PTU) به ميزان 500 ميلي گرم درليترآب آشاميدني تيروييدكتومي شيميايي شدند.گروه كنترل فقط آب آشاميدني معمولي دريافت كردند.پس ازگذشت سه هفته رت ها قرباني شدندوتخمدانهاي آنهاپس ازتشريح براي آماده سازي بافتي فيكس گرديد. جهت تعيين شاخص تكثيرسلولي از تكنيك ايمونوهيستوشيمي PCNA وبراي شمارش سلول ها ازروش استريولوژيك استفاده شد. نتايج : ايندكس تكثير سلولي به تناوب رشد فوليكولارازفوليكول Preantral تا فوليكول Graafian كاهش معني داري رادرگروه هيپوتيروييد نشان داد (P < 0.05) ، وليكن درفوليكولهاي با آنتروم گسترده افزايش مختصري مشاهده گرديد كه البته معني دارنبود (0.05 P > ). مشخص شد كه شروع بيان PCNA ازاوايل رشد فوليكول Primary آغاز مي شود . درگروه هاي مورد مطالعه سلول PCNA مثبت درفوليكولهاي Primordial مشاهده نگرديد . نتيجه نهايي : برطبق نتايج اين مطالعه اين فرضيه مطرح مي شود كه ممكن است افزايش ابتدايي درسلولهاي گرانولوزا در فوليكولهاي درحال رشد بواسطه سلولهاي مجاورفوليكول وموجود دراستروماي تخمدان صورت پذيرد. تغييرات هورموني متعاقب كاهش هورمون هاي تيروييدي ممكن است به شدت برشاخص تكثير سلولي اثربگذارد و منجربه دژنراسيون سريعتر فوليكولها شود.

Introduction & Objective: The normal females reproductive function , needs hypothalamus-hypophysis-ovarian extensive hormonal messages. Primary hypothyroidism is characterized by reduced production and secretion of thyroid hormones. During follicular growth PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) and cycklin D complex play an important role in regulating cell proliferation .This study aimed to determine the cell proliferation index and how this process changes induced by thyroid hormone decreased in rat ovarian follicles. Materials & Methods: In this experimental study, 20 Wistar female rats were divided into experimental and control groups. Experimental group was chemically thyroidectomized by administering propylthiouracil (PTU) (500 mg per liter of drinking water). The control group received normal drinking water. After three weeks rats were killed and their ovaries dissected and fixed for the histological preparation. Cell proliferation was determined by PCNA and stereological methods were used for counting cells. Results: Cell proliferation index showed a significant decrease in the frequency of follicular growth from prenatal to graafian follicles in hypothyroidism groups(P < 0.05). However, a slight increase was observed in follicles with extensive antrum but it was not significant(P > 0.05) . PCNA expression determined that Primary follicle growth begins earlier. Positive PCNA cells were not observed in primordial follicles of the groups. Conclusion: According to the results of our study, this hypothesis is raised that granulosa cells in growing follicles may be increased by follicle adjacent cells in ovarian stroma . Hormonal changes following the reduction of thyroid hormones may greatly affect the cell proliferation index and lead to faster follicle degeneration.