اثرات برخي از عوامل بيوشيميايي بر فعاليت آنزيم تريپسين روده و ضمايم پيلوريك كيلكاي معمولي (Clupeonella cultriventris caspia) براي جلوگيري از پديده هضم ديواره شكمي در محيط in vitro

In-vitro effects of biochemical factors on trypsin activity from intestine and pyloric caeca of common kilka (Clupeonella cultriventris) for inhibiton of belly bursting

در اين تحقيق عوامل بيوشيميايي موثر در فعاليت آنزيم تريپسين روده و ضمايم پيلوريك كه در پديده هضم ديواره شكمي (Belly Bursting) در ماهي كيلكاي معمولي (Clupeonella cultriventris caspia) نقش دارد، مورد مطالعه قرار گرفتند. بررسي عوامل دما، pH، عناصر فلزي و بازدارنده‌ها نشان داد كه آنزيم تريپسين در دامنه دمايي بين 70- 4 درجه سانتيگراد، بيشترين فعاليت را در دماي 60 درجه سانتيگراد داشت و توانست پايداري خود را تا دماي 55 درجه سانتيگراد نيز حفظ نمايد. بررسي فعاليت آنزيم تريپسين در دامنه pH 4 تا 11 نشان داد كه آنزيم تريپسين بالاترين فعاليت را در pH 5/8 داشت و بالاترين پايداري را نيز در اين pH نشان داد. اثر عناصر فلزي بررسي شده در اين تحقيق نيز آشكار نمود كه CaCl2، MgCl2 و MnCl2 اثر افزايشي و عناصر CuCl2، ZnCl2 و Al2(SO4)3 اثر كاهشي بر فعاليت آنزيم تريپسين از خود نشان دادند. بازدارنده‌هاي SBTI، PMSF، TLCK و ?-aminobenzamidine نيز اثر بازدارندگي روي فعاليت آنزيم تريپسين روده و ضمايم پيلوريك نشان دادند و از بين آنها SBTI و TLCK كه دو بازدارنده اختصاصي براي آنزيم تريپسين هستند بطور معني‌داري از فعاليت آنزيم جلوگيري نمودند. نتايج اين بررسي‌ها در محيط in vitro نشان داد كه استفاده از دماي پايين (4 درجه سانتيگراد)، pH اسيدي، عناصر CuCl2، ZnCl2 و Al2(SO4)3 و بازدارنده‌هايSBTI و TLCK مي‌توانند از فعاليت آنزيم تريپسين در روده و ضمايم پيلوريك و از هضم ديواره شكمي ناشي از فعاليت آنزيم تريپسين جلوگيري نمايند.

The in-vitro effects of biochemical factors on trypsin activity from intestine and pyloric caeca of common kilka (Clupeonella cultriventris caspia) was evaluated. Trypsin is known to cause belly bursting in common kilka. The assessments showed that in a range of 4-70°C, trypsin from pyloric caeca and intestine of common kilka had the maximum activity and the satiability at 60 and 55°C, respectively. The pH assessments indicated that maximum activity and stability for trypsin were at 8.5 at pH range of 4-11. The effects of metal ions on trypsin activity revealed that CaCl2, MgCl2 and MnCl2 increased trypsin activity while CuCl2، ZnCl2 and Al2(SO4)3 decreased its activity. The effect of inhibitors on trypsin activity also showed that SBTI and TLCK (specific inhibitors for trypsin) significantly inhibited trypsin activity. This study suggests that belly bursting in common kilka can be prevented by trypsin inactivation through application of low temperature (4°C), acidic pH, metals of CuCl2, ZnCl2 and Al2(SO4)3 and inhibitors of SBTI and TLCK.