بافت شناسي و مكان يابي ايمنيايي سلول هاي يونوسيت در آبشش بچه ماهي هامور معمولي(Epinephelus coioides)

(Histology and Immunolocalization of Ionocyte Cells in Gill of Juvenileʹʹs Grouper (Epinephelus coioides

به منظور مطالعه بافت شناسي آبشش نمونه هاي مورد نظر پس از تهيه در فيكساتيو بوين فيكس شده و بعد از آبگيري در اتانول، پارافينه شدند. در مرحله بعدي برش هايي از بلوك ها به ضخامت 5 ميكرون تهيه شد و براي مطالعه استفاده گرديد. آنگاه فتوميكروگراف هاي لازم با استفاده از ده ميدان ميكروسكوپي H&E بافت شناسي از رنگ آميزي نوري آماده گرديد. همچنين ب همنظور تعيين محل سلول هاي يونوسيت آبشش بچه ماهي هامور معمولي از روش مكان يابي ايمنيايي اين آنزيم استفاده شد. به علاوه پس از انجام مراحل آماده سازي براي مطالعات ايمونوهيستوشيمي استفاده شد. سرانجام به منظور مشاهده سلول هاي يونوسيت از (FITC) و ثانويه (IgG? نيز از آنت يبادي هاي اوليه ( 5 ميكروسكپ نوري فلويورسنت با فيلترهاي 490 450 نانومتر استفاده شد. در مطالعات ايمونوهيستوشيمي، سلول هاي در غشا قاعده اي جانبي خود به دليل شدت Na+, K+- ATPase يونوسيت به واسطه داشتن مقادير زيادي از آنزيم انتشار نور بيشتر قابل شناسايي توسط ايمونوهيستوشيمي آنزيم بودند و مكان قرارگيري آنها در ناحيه قاعده و فضاي سلول هاي يونوسيت را مي توان (E. coioides) بين تيغ هها مشخص گرديد. بنابراين در آبشش ماهي هامور معمولي Na+, K+- ATPase به روش ايمنيايي مكان يابي كرد. با توجه به يافته هاي اين تحقيق كه نشان دهنده ي حضور آنزيم در غشا قاعده اي جانبي يونوسيت ها است، مي توان نتيجه گرفت كه سلول هاي يونوسيت در فرآيند تنظيم اسمزي مشاركت فعالان هاي دارند.

In order to assess the position of ionocyte cells in the gill of juvenile E. coioides using immunolocalization method, 10 specimens were prepared and fixed in the bouin’s solution for 24 h. After fixation, specimens were dehyderated through a graded ethanol series and embedded in paraffin. Then, the serial sections of 5 ?m were mounted onto the glass slides. The slides were stained by applying H&E methods for histological examination in ten microscopic field. Primary (IgG?5) and secondary (FITC) antibodies were used for immunohistochemical staining. In this study, fluorescent microscope includes 450- 490 nm filters was used for observation of ionocytes cells. Ionocyte cells are detectable with high frequency of Na+, K+- ATPase in their basolateral membrane, using immunohistochemical method. In the present study, Na+, K+- ATPase was identified in the basolateral membrane of ionocyte cells of gill. As was mentioned, ionocyte cells and subsequently Na+, K+- ATPase could be localized in gill of E. coioides using immunohistochemical method. The results showed that ionocyte cells located in base and inter lamellar situation. The presence of enzyme in the basolateral membrane of ionocyte cells, characterized the role of ionocyte cells in osmoregulation.