بررسي اثر آنتي باكتريال غشاي آمنيوتيك انسان در شرايط متفاوت زماني، دمايي و pH

The Impact of Environmental Factors on the Antibacterial Properties of Human Amniotic Membrane in vitro

زمينه و هدف: غشاي آمنيوتيك انسان داخلي‌ترين لايه‌ي جفت مي‌باشد كه به دليل حضور بتا دفنسين‌هاي انساني و الافين‌ها داراي اثر ضدميكروبي است. فعاليت‌هاي ضد ميكروبي به شرايط و عوامل محيطي بستگي دارد. هدف از اين مطالعه، بررسي تاثير عوامل محيطي بر تغيير اثر آنتي‌باكتريال غشاي آمنيوتيك انساني در رابطه با سويه‌هاي استاندارد باكتريايي سالمونلا انتريكا 708BAA-، اشريشيا كلي25922ATCC، سودوموناس آيروژينوزا 27853ATCC ، كلبسيلا پنومونيه 7881ATCC ، انتروكوكوس فكاليس 29212ATCC در آزمايشگاه بود. روش بررسي: غشاي آمنيوتيك از بانك پيوند اعضا‌ي بيمارستان امام خميني از زناني با سزارين انتخابي كه از نظر تست‌هاي سرولوژيك HIV، HBV،HCV و سيفليس منفي بودند، تهيه شد و در شرايط استريل به قطعات cm5/1×5/1 برش داده شد و سپس سوسپانسيون‌هاي نيم مك فارلند تهيه شده از باكتري‌ها روي محيط مولر هينتون آگار پخش گرديد (در بررسي pHسه نوع محيط كشت تهيه گرديد.) و در مركز هر پليت يك قطعه غشا قرار گرفت. نمونه‌ها به لحاظ متغير‌هاي دمايي (25، 33 و 37 درجه‌ي سانتي‌گراد) و زماني (24، 48 و 72 ساعت) و pH(5/6، 7، 5/7) بررسي شدند. يافته‌ها: متغيرهاي pH و زمان تاثيري دراثر ضد باكتريايي غشا نداشتند؛ اما دماهاي 25 و 33 درجه‌ي سانتي‌گراد تنها در سودوموناس آيروژينوزا نسبت به 37 درجه‌ي سانتي‌گراد تغيير قابل توجهي را داشتند. نتيجه‌گيري: اثر ضد باكتري غشاي آمنيوتيك به جز مواردي خاص، از ثبات بالايي در برابر عوامل محيطي برخوردار است و اين پايداري كاربرد آن را در عملكردهاي باليني و در شرايط مختلف گسترش خواهد داد.

Background and Objective: Human amniotic membrane, which is the innermost layer of placenta, contains beta defensins and elafin, which both have antibacterial properties. These antibacterial activities depend on the conditions and environmental factors. The purpose of this study was to evaluate the effect of environmental factors on human amniotic membrane antibacterial properties against Klebsiella pneumonia (ATCC7881), Entrococcus faecalis (ATCC29212), Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853), Salmonella enteric (BAA-708), and E. coli (ATCC25922) strains in vitro. Materials and Methods: The amniotic membrane samples were obtained from caesarean women in Imam Khomeini hospital. Participating women were all seronegative for HIV, HBV, HCV, and syphilis. The samples were cut into 1.5×1.5 cm pieces. The 0.5 McFarland bacterial suspensions were prepared and spread on Muller-Hinton agar medium, and a piece of membrane was placed in the centre of each plate. Samples were examined at different time intervals (24, 48, and 72 hr), temperatures (25, 33, 37°C) and pH (6.5, 7, and 7.5) as variables. Results: The results show that time and pH as variable parameters did not affect the antibacterial properties of the amniotic membrane. However, the change in temperature (25 and 33°C vs. 37°C) had a significant impact on P. aeruginosa. Conclusion: Antibacterial properties of the amniotic membrane seem resistant against environmental factors, except for especial cases, and this sustainability could expand its usage in clinical procedures and different conditions.