بررسي ساختار ژنتيك جمعيت گاو ماهي سرگنده (Neogobius gorlap) درياي خزر در سواحل استان‏هاي گلستان و مازندران با استفاده از نشانگرهاي ريزماهواره‏اي

Investigation of Neogobius gorlap population genetic structure in coasts of Maxandaran and Golestan provinces by microsatellite markers

به منظور مطالعه ساختار ژنتيك جمعيت‌هاي گاو ماهي سرگنده (Neogobius gorlap) با استفاده از نشانگرهاي ريزماهواره‏اي، تعداد 100 نمونه ماهي از سواحل استان‏هاي گلستان و مازندران جمع‏آوري شد. DNA ژنومي نمونه‌ها از بافت نرم باله ماهي به روش فنل- كلروفرم استخراج و سپس كميت و كيفيت DNA استخراج شده با استفاده از بيوفتومتر و الكتروفورز ژل آگارز 1 درصد تعيين شد. واكنش PCR با استفاده از 6 جفت پرايمر ميكروستلايت صورت گرفت. محصول PCR با استفاده از ژل پلي آكريل آميد 8% الكتروفورز و با نيترات نقره رنگ‏آميزي شد. مقادير مربوط به فراواني آللي، تعداد آلل‏هاي واقعي و موثر، هتروزايگوسيتي مشاهده شده و مورد انتظار، ميزان شباهت و فاصله ژنتيكي، تعادل هاردي- واينبرگ، مقادير FST, RST و جريان ژني بر اساس آزمون AMOVA با استفاده از نرم افزار ژنتيكي Gene Alex محاسبه گرديد. نتايج بدست آمده نشان داد كه هر 6 جايگاه ريزماهواره‏اي بررسي شده در گاوماهي سرگنده پلي‌مورف بودند. ميانگين تعداد آلل‏هاي مشاهده شده و موثر به ترتيب 41/12 و 02/8 بوده و ميانگين هتروزيگوسيتي مشاهده شده و مورد انتظار به ترتيب 695/0 و 845/0 محاسبه شد. بر اساس نتايج بدست آمده در هر دو منطقه مازندران و گلستان و در جايگاه‏هاي مختلف بجز جايگاه‏هاي NG71، NG111 و NG215 در سواحل گلستان انحراف از تعادل هاردي- واينبرگ مشاهده شده است (001/0 < P). همچنين مقدار FST بين نمونه‌هاي سواحل گلستان و مازندران 034/0 و مقدار Nm بين دو منطقه 726/8 بود. فاصله ژنتيكي و شباهت ژنتيكي بين نمونه‏هاي دو منطقه 354/0 و 702/0 بود. با توجه به مقدار FST حاصل از آزمون AMOVA، تنوع ژنتيكي بين نمونه‏هاي سواحل مازندران و گلستان معني‏دار بوده است (01/0 < P). بر اين اساس مي‏توان عنوان نمود كه 2 گروه ژنتيكي متفاوت از اين گونه در حوضه جنوبي درياي خزر( سواحل مازندران و گلستان) وجود دارد.

Genetic diversity of Neogobios gorlap poplution were examined on 100 samples from regions in southern of the Caspian Sea (Mazandaran and Golestan regions). Genomic DNA was extracted from fin tissue by phenol - chlorophorm method. PCR was performed using microsatellite primers. The PCR products of samples were accompanied with standard marker (50 bp lader). To measure fragment size samples were run on a 8% polyacrylamid gel. Allel count and frequency, the effective and real allel, expected heterozygosity and observed heterozygosity, genetic diversity, shannon Information index, genetic identity and genetic distance, FST, RST, gene flow and Hardy-Weinberg Equilibrium based on Analysis of Molecular Variance (AMOVA) were caculated using the Gene Alex software. The mean of observed and effective allel number was 12.41 and 8.02 respectively and also the mean of observed and expected heterozygosity was 0.695 and 0.845 respectively. It was also seen that specimens from all regions (exception locus NG71, NG111 and NG215 in Golestan region) were not in Hardy- Weinberg Equibrium in all of the loci (P < 0.001). Bassed on Analysis of Molcular Variance (AMOVA) FST was 0.028 between Golestan and Mazandaran regions. Also Nm was 8.726 between Golestan and Mazandaran regions. Genetic distance was 0.354 between specimens from Mazandaran and Golestan regions. As result, there is a significant genetic divergence between some of samples (P < 0.01). Therefore, two genetic group of Neogobios gorlap were identified in Southern part of the Caspian Sea (Mazandaran and Golestan regions).