مقايسه روش هاي كانترايمونوالكتروفورزيس و واكنش زنجيره اي پلي مراز در تشخيص هيداتيدوزيس گوسفند

Comparison of the validity of CIE and PCR diagnostic methods in determining hydatidosis in sheep

گوسفند به عنوان يكي از مناسب ترين ميزبان هاي هيداتيدوزيس در ايران است و ايران به عنوان يكي از نواحي هيپراندميك در دنيا مطرح مي باشد. در اين تحقيق، ارزيابي واكنش پادگني در مجاورت با آنتي سرم تهيه شده از گوسفند در مقايسه با يافته هاي كشتارگاهي و مولكولي انجام شد. در مطالعه حاضر براي تهيه پادگن محلول از مايع كيست هيداتيد استفاده گرديد. خون مورد نياز براي تهيه سرم از100 راس گوسفند در حين كشتار تهيه شد. يافته هاي كشتارگاهي در گوسفندان خونگيري شده آلوده به كيست هيداتيد ثبت گرديد. سپس آزمون كانترايمنو الكتروفورزيس در حضور سرم هاي شاهد منفي و مثبت انجام شد. استخراج DNA از پرتواسكولكس انجام شد و قطعه bp 1213 از ژن co1 تكثير گرديد. در مشاهدات كشتارگاهي، 33 درصد گوسفندان آلوده به كيست هيداتيد در كبد و ريه بودند. در صورتي كه موارد مثبت آلودگي در روش كانترايمنوالكتروفورزيس 29 درصد و در روش مولكولي 28 درصد بود. در مقايسه با يافته هاي كشتارگاهي، حساسيت و ويژگي آزمون كانترايمنوالكتروفورزيس به ترتيب 31/79درصد و 2/92درصد بود. ارزش تشخيصي روش مولكولي با حساسيت 19.85 درصد و ويژگي8 .94 درصد بود. مقايسه يافته هاي آزمون سرمي به روش كانترايمنوالكتروفورزيس با روش تشخيص مولكولي نشان داد كه حساسيت و ويژگي آزمون كانترايمنوالكتروفورزيس كمتر بود ولي اختلاف آماري، معني داري نداشت (05/0 > P). باتوجه به نتايج بدست آمده در اين مطالعه، آزمون كانترايمنوالكتروفورزيس مي تواند روش غربالگري مناسبي براي هيداتيدوزيس گوسفندان باشد.

Sheep is one of the important hosts for hydatidosis in Iran as a hyperendemic region worldwide. In the present study, the efficacy of counter immuno-electerophoresis (CIE) and PCR tests to detect sheep hydatid cyst infection was carried out. For this, soluble antigen was provided using hydatid cyst fluids (HCFs). Blood sera were taken from a total number of 100 slaughtered sheep. CIE analysis was undertaken using negative and positive controls. DNA was extracted from protoscolices and a 1213bp fragment length of co1 gene amplified. Necropsy findings indicated that lung and liver of slaughtered sheep (33%) was infected with hydatid cyst. While it was 29% in CIE and 28% in PCR test. According to the necropsy findings as a gold standard test, sensitivity and specificity of CIE was 79.31% and 92.2%, respectively. Sensitivity and specifity of PCR test were determined 85.19% and 94.8%, as well. Data analysis showed that there is no significant difference between these two techniques (P < 0.05). Based on these results, CIE technique can be considered as a useful method to screen sheep hydatid cyst infection.