بهينه‌سازي شرايط توليد اندوگلوكاناز باكتري‌هاي آكتينوميست جدا شده از كمپوست قارچ خوراكي

Optimizing the Condition for Endoglucanase Production in Actinomyces Isolates of Edible Mushroom Compost

باكتري‌هاي جنس آكتينوميست‌، تجزيه‌كنندگان خوبي در طبيعت بوده و از نظر كشاورزي حايز اهميت‌ مي‌باشند. اين باكتري‌ها در كمپوست به فراواني حضور دارند و منابع مهم توليد آنتي‌بيوتيك‌ها و آنزيم‌هاي خارج سلولي هستند. جدايه‌هاي آكتينوميست مورد مطالعه در اين پژوهش از مراحل متفاوت كمپوست‌سازي قارچ خوراكي تهيه شده‌ و سپس جدايه‌ها مورد تجزيه و تحليل ميكروسكوپي، بيوشيميايي و مولكولي قرار گرفتند و شناسايي شدند. براي اندازه‌گيري فعاليت اندوگلوكانازي جدايه‌ها، از روش اندازه‌گيري كربوكسي متيل سلولاز (CMC) استفاده شد. جهت بهينه‌سازي شرايط، pH‌هاي 7/5، 6، 5/6، 7 و 5/7 دماهاي °C65-45 و زمان‌هاي واكنش 30، 60 و 90 دقيقه بررسي شد. دماي °C60 بهترين دمايي بود كه آكتينوميست‌هاي مورد مطالعه، بالاترين فعاليت اندوگلوكانازي را نشان دادند. در اين دما جدايه 19 با 289/0 واحد در‌ ميلي‌ليتر فعالترين جدايه از نظر توليد اندوگلوكاناز بود. براساس نتايج مولكولي حاصل از بررسي شباهت جدايه ها با RFLP ژن 16SrRNA، اغلب جدايه‌ها از جنس استرپتومايسس بودند.

Actinomyces bacteria are the best parser microrganisms in environment and agriculture. These bacteria are frequent in compost and produce antibiotics & extracellular enzymes. In this study, some strains of actinomycetes were separated from different steps in composting process. After that, morphological, biochemical and molecular tests were performed for identification of them. Carboxy Methyl Cellulase assay was applied for endoglucanase activity. For optimizing conditions different treatments including pHs: 5.7, 6, 6.5, 7, 7/5, temperatures 45-65°C and times 30, 60 and 90 minutes were used. Optimum temperature for high endoglucanase activity was 60°C and isolate No.19 with 0.289 unit/ml showed the highest endoglucanase activity in this temperature. According to molecular result obtained from RFLP of 16SrRNA, most of actinomyces isolates were from streptomyces genus.