تاثير زهر زنبور عسل در القا تمايز رده سلوليK562 به دودمان اريتروييدي

The effect of Honey bee venom on induction of differentiation of k562 cell line to erythroid linage

چكيده سابقه و هدف: از زهر زنبور عسل (BV) در طب سنتي براي درمان بيماري‌هايي مانند ورم مفاصل وبيماري‌هاي پوستي استفاده مي شود. BV حاوي مليتين، فسفوليپازA2، آپامين و ديگر مواد فعال بيولوژيك است. با توجه به تركيبات BV، هدف اين تحقيق بررسي اثرات آن بر القا تمايز رده سلولي K562 به سمت دودمان دودمان اريتروييدي است. روش بررسي: در اين تحقيق تجربي، ميزان سميت زهر BV با سنجشMTT اندازه گيري شد. نوع مرگ سلولي به وسيله ارزيابي بيان ژن Annexin-V با فلوسيتومتري تعيين و اثر BV بر القا تمايزرده سلولي K562 به سمت دودمان اريتروييد با رنگ آميزي بنزيدين سنجيده شد. توانايي زهر زنبور عسل بر مهار كلوني زايي با سنجش كلوني و تغييرات مورفولوژي اين رده سلولي درپي تيمار با زهر زنبور عسل با رنگ آميزي رايت – گيمسا ارزيابي شد. يافته ها: نتايج حاصل از تست MTTنشان داد BV درغلظتµg/ml 6-5/5 در 24 ساعت و غلظت هاي µg/ml 5/4-5/3 در 48ساعت منجر به مرگ 50 درصد سلول‌ها مي‌شود. نتيجه گيري: نتايج حاصل از تست بنزيدين و بررسي هاي مورفولوژيك نشان داد دوزهاي پايين‌ترBV در بازه زماني طولاني موجب القا تمايز اين سلول ها مي شوند. نتايج فلوسيتومتري افزايش بيان ژن Annexin-V در سلول‌ها تيمار شده با BV را در 24 ساعت نشان داد. سنجش كلوني نشان داد BV در غلظت µg/ml1منجر به كاهش ?? درصدر كلوني زايي اين سلول‌ها مي‌شود

Background: Complementary medicine uses bee venom (BV) to treat several diseases, including arthritis and skin diseases. BV contains mellitin, phospholipase A2, apamin and several other bioactive substances. According to the venom compounds, the purpose of this study was to examine the effects of BV on differentiation of K562cell line. Materials and Methods: In this experimental study, K562cells were treated with different doses of BV in different durations. BV toxicity was evaluated by MTT assay. Benzidine staining was used to investigate the effects of BV on K562 cell differentiation toward the erythroid line. In order to determine the type of cell death, annexin-V gene expression was analyzed by flow cytometry. Colony assay was used to measure BV ability in inhibiting colony formation. Morphological changes in the cells undergone treatment with BV were evaluated by wright-giemsa staining. Results: MTT assay showed that bee venom with concentrations of 5.5-6 ?g/ml and 3.5-4.5?g/ml result in 505 cell death in 24h and 48h, respectively. Conclusion: Morphological examination and benzidine staining showed that lower doses in longer period induce differentiation in these cells. Flow cytometry data showed significantly increased in annexin-V gene expression in cells which were treated with bee venom for 24 h. Colony assay demonstrated that the concentration of 1 ?g/ml of BV results in 50% reduction in colony formation