بررسي بيماري شانكر درختان ميوه هسته‌دار و اثر ضد باكتريايي برخي اسانس‌هاي گياهي بر باكتري عامل آن در استان كرمان *

STUDY ON CANKER DISEASE OF STONE FRUITS AND ANTIBACTERIAL EFFECTS OF SOME PLANT ESSENTIALS ON ITS CAUSAL AGENT IN KERMAN PROVINCE *

علايم بيماري شانكر باكتريايي درختان ميوه هسته‌دار در مناطقي از استان كرمان به‌صورت پراكنده مشاهده شد. از نمونه‌هاي مشكوك، باكتري سودوموناس روي محيط آگار غذايي حاوي ساكاروز جدا گرديد. تعدادي از جدايه‌ها در توتون فوق‌حساسيت ايجاد كردند، كاتالاز مثبت بوده، در محيط 5 درصد نمك طعام رشد كردند و توانايي توليد رنگدانه سبز فلورسنت، هيدروليز ژلاتين، كازيين، آربوتين و تويين 80 را داشتند. واكنش اكسيداز، اوره‌آز و آرژنين دهيدرولاز منفي و هيدروليز نشاسته، لستيناز، احيا نيترات، توانايي در لهانيدن ورقه‌هاي سيب‌زميني و رشد در°C37 در آنها ديده نشد. اين جدايه‌ها ازگالاكتوز، مانوز، مانيتول، سوربيتول و آرابينوز اسيد توليد كرده، ولي هيچكدام از لاكتوز، مالتوز و دي- تارتارات استفاده نكردند. جدايه‌هاي اكسيداز منفي با توليد زهرابه از رشد قارچ Geotrichum candidum ممانعت نمودند و قطعه 720 جفت بازي از ژن syrB در آنها تكثير شد. نقوش الكتروفورزي پروتيين‌هاي سلولي اين جدايه‌ها شبيه به پاتووار مرجعPseudomonas syringae pv. syringae (IBSBF451) بود و بيماري‌زايي آنها با تزريق سوسپانسيوني حاوي 106 سلول در هر ميلي‌ليتر به سرشاخه‌هاي هلو، به اثبات رسيد. براساس نتايج آزمون‌هاي فنوتيپي و تعيين توالي ناحيه ITS، باكتري‌هاي مذكور Pseudomonas syringae pv. syringae تشخيص داده شدند. براي بررسي اثر ضدباكتريايي، اسانس تعدادي از گياهان استخراج و در شرايط آزمايشگاهي بر جدايه‌ها آزموده و نتايج آن با اثر 13 تركيب آنتي‌بيوتيكي مورد مقايسه قرار گرفت. بررسي‌ها نشان داد كه از ميان آنتي‌بيوتيك‌ها، تتراسايكلين، اكسي‌تتراسايكلين و داكسي‌سايكلين از رشد كليه جدايه‌ها ممانعت به عمل آوردند، اما در برابر آمپي‌سيلين، سفالكسين و اگزاسيلين، حساسيت مشاهده شد. آزمون مذكور نشان داد كه برخي از اسانس‌ها داراي خاصيت ضد باكتريايي هستند و در ميان آنها اسانس آنغوزه و رزماري، داراي بيشترين تاثير بوده و با اثرات اكسي‌تتراسايكلين و داكسي‌سايكلين برابري مي‌كنند.

Symptoms of stone fruits canker were observed in some part of Kerman province. Strains in which the gram reaction was negative were investigated based on physiological and biochemical characteristics. Some tested strains were positive for levan production, hydrolysis of tween 80, gelatin, casein, arbutin, catalase, fluorescent pigment production, tobacco HR and tolerant to 5% NaCl but negative for oxidase, urease, hydrolysis of starch, arginine dihydrolase, growth at 370 C, potato rot, indole production and reduction of nitrate to nitrite. These strains produced acid from glucose, fructose, cellobiose, sucrose, galactose, mannose, mannitol, xylose, sorbitol, inositol and arabinose but did not produce acid from lactose, maltose and D-tartarate. Thses strains prevented the growth of Geotrichum candidum by toxin production and PCR amplification with the syrB primers yielded the expected 720 bp fragment from all pathogenic strains. The electrophoretic profiles of the cell proteins of the strains were closely similar to reference strain, Pseudomonas syringae pv. syringae(IBSBF 451). The pathogenicity of representative strains was improved by injection of suspension of 106 cell/ml to branches tip and flowing symptoms observation and re-isolation of agent. The isolates were determinate as Pseudomonas syringae pv. syringae based on phonotypical futures and sequences of ITS. Antibacterial effect of plant extracted was studied under laboratory conditions on bacterial isolates. The results were compared with effects of 13 well known antibiotics. Results indicating that among used antibiotics, Tetracycline, Oxytetracycline and Doxycycline have significant effect on the growth of all strains but, all the strains showed resistance to Penicillin, and. This study revealed that all the extracts have antibacterial effect and among them extracts of Ferula assa-foetida and Rosmarinus officinalis have the best effect that is comparable to the effect of Tetracycline.