بررسي پاسخ ايمني هومورال ماهي قزل آلاي رنگين كمان به دو نوع باكترين تهيه شده از استرپتوكوكوس اينيايي منطقه اي بروش اليزا

Humoral immune response of rainbow trout to two bacterins prepared from Streptococcus iniae evaluated by ELISA

به منظور ارزيابي پاسخ ايمني هومورال ماهي قزل آلاي رنگين كمان عليه باكتري استرپتوكوكوس اينيايي، عامل سپتي سمي عفوني در ماهيهاي قزل آلاي رنگين كمان، دو نوع آنتي ژن حاصل از باكتري كشته شده با حرارت و كشته شده با فرمالين تهيه گرديد. سپس 90 قطعه ماهي با ميانگين وزني 6/49 گرم (در 6 گروه 15 تايي) با سه روش تجويز شامل روش خوراكي (107 باكتري كشته شده به ازاي هر قطعه ماهي)، روش غوطه ورسازي (107 باكتري كشته شده در هر ميلي ليتر مايع غوطه ورسازي) ‌و روش تزريقي (107 باكتري كشته شده به ازاي هر قطعه ماهي) در معرض آنتي ژنها قرار گرفتند. براي گروه شاهد از 15 قطعه ماهي قزل آلاي رنگين كمان كه هيچگونه آنتي ژني دريافت نكرده بودند، استفاده شد. پس از گذشت 30 روز از ايمن سازي، از محل وريد دمي ماهيها خون جمع آوري و سرم آنها جهت آزمايش مورد استفاده قرار گرفت. براي تعيين پاسخ ايمني هومورال به آنتي ژنها از آزمايش اليزا استفاده گرديد. نتايج آزمايشها نشان داد كه در هر دو نوع آنتي ژن، استفاده از شيوه تزريقي بيشترين ميزان پاسخ ايمني هومورال را در پي داشت. تفاوت معني داري بين ميزان پاسخ ايمني حاصله از هر دو نوع آنتي ژن به شيوه تزريقي مشاهده نشد (05/0P < ) ولي در روش غوطه ورسازي تجويز آنتي ژنها، تفاوت معني داري با گروه شاهد مشاهده گرديد. تجويز آنتي ژن كشته شده با حرارت به روش غوطه ورسازي پاسخ ايمني هومورال بيشتري نسبت به تجويز آنتي ژن كشته شده با فرمالين به شيوه مشابه ايجاد نمود و در روش خوراكي تجويز هر دو نوع آنتي ژن تفاوت معني داري در مقايسه با گروه كنترل نداشت. به طور كلي تجويز آنتي ژنهاي كشته شده با حرارت و كشته شده با فرمالين به روشهاي تزريقي و غوطه ورسازي پاسخ ايمني بيشتري را نسبت به روش خوراكي ايجاد نمودند

This study evaluated the humoral immune response of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) against Streptococcus iniae, a regional fish pathogen, the aetiological cause of streptococcosis with a septicemic infection in rainbow trout cultured in Fars province as well as other provinces in Iran. For this, two different preparation of antigens including heat killed and formalin killed antigens were prepared. Ninety fish in six groups were exposed to these antigens via three routes of administration including intraperitoneal injection (107 killed bacterium/fish), immersion (107 killed bacterium/ml) and oral (107 killed bacterium/fish). For control group 15 rainbow trout injected with phosphate buffered saline were used. Fish were bled 30 days after immunization, serum sample was collected from each fish and the fish humoral response was detected by ELISA. Results showed that using both antigens by injection route induced the highest humoral response similarly. Immersed fish in both antigens showed significant humoral responses with a significant higher response by heat killed streptococcal antigens (P < 0.05). Oral immunization of rainbow trout with streptococcal antigens did not reveal a significant immune response when compared with control.