بررسي پايداري دمايي اينترفرون گاماي نوتركيب انساني حاصل از ميزبان اشريشيا كولي

Thermal Stability of Recombinant Human Interferon Gamma Produced in E.coli

همزمان با توسعه داروهاي پروتييني نوتركيب، توجه به مسيله پايداري پروتيين‌هاي نوتركيب با مصرف دارويينيز از اهميت بسزايي برخوردار است. در اين تحقيق، پايداري اينترفرون گاماي نوتركيب انساني در بازه زماني 0-9 ماه پس از توليد و در شرايط نگهداري دمايي متفاوت?4 و?25 بررسي شد. فعاليت بيولوژيك پروتيين و دايمرشدن كووالان، دآميداسيون و اكسيداسيونپروتيين از طريق روش‌هاي كشت سلولمبتني بر سنجش اثر فعاليت ضد ويروسي پروتيين، آناليز كروماتوگرافي مايع فشار بالا و الكتروفورزSDS-PAGEارزيابي شد. نتايج بيانگر اين است كه فعاليت ضد ويروسي پروتيين در دماي ?4 تقريبا ثابت مي‌ماند، اما روند كاهش فعاليت بيولوژيكبا افزايش دما در?25 ادامه مي‌يابد. روند تشكيل فرم‌هايدآميده-اكسيده و دايمر كووالان در دماي ?25 نسبت به ?4 طي زمان مذكور، سريع‌تر است.لذا نتايج نشان مي‌دهد كه اينترفرون گاماي نوتركيب توليدي در دماي ?4 نسبت به ?25 از پايداري بيشتري برخوردار است.

The stability of recombinant proteins has become an increasingly important as more protein therapeutics are developed.In this study, the stability of recombinant human interferon gamma was investigated under storage condition for 0-9 months after production time at 4 and 25?. The evaluation of biological activity, covalent dimerization, deamidation and oxidation of protein was done by cell culture, HPLC and SDS- PAGE. The results showed represents that antiviral activity was not decreased at 4? but decreased as temperature increased to 25?. The inormation rate of deamidated and oxidized forms and covalent dimers at 25? was more rapid than 4?. Therefore, rhIFN-? has high stability at 4? comparing to 25?.