تاثير miR-146a و miR-150 بر القاي تمايز سلول‌هاي لنفوييدي T در سلول‌هاي بنيادي خونساز

Effect of miR-146a and miR-150 on T-cell lymphoid differentiation of hematopoietic stem cells

چكيده سابقه و هدف ميكرو RNAها، كلاسي از RNAهاي كوچك غير كدكننده هستند و اخيراً نشان داده شده است كه نقشي اساسي در فرآيندهاي مهم سلولي از جمله تكامل و تمايز از طريق تنظيم پس از ترجمه، ايفا مي‌كنند. نقش اين عناصر در رده سلول‌هاي خونساز نيز بررسي شده است و شواهد زيادي دال بر دخالت ميكروRNA هاي شماره 150 (miR-150) و 146 (miR-146a) در تمايز لنفوسيت‌هاي T وجود دارد. هدف از اين مطالعه، بررسي تاثير افزايش بيان miR-150 و miR-146a در سلول‌هاي بنيادي خونساز و توانايي اين دو ميكرو RNA در تمايز سلول‌هاي بنيادي به سمت سلول‌هاي لنفوييدي T بود. مواد و روش‌ها در يك مطالعه تجربي، القاي افزايش بيان دو miR-146a و miR-150 در سلول‌هاي بنيادي خونساز CD133+ جدا شده از خون بند ناف صورت گرفت. پس از هفت روز، فرآيند تمايز به لنفوسيت‌هاي T با ماركرهاي CD4 و CD8 توسط روش فلوسيتومتري سنجيده شدند. هم چنين افزايش بيان اين دو ميكروRNA با روش‌هاي RT-PCR وquantitative Real Time PCR بررسي شد. يافته‌ها سلول‌هاي بنيادي خونساز CD133+ جدا شده از خون بند ناف، يك هفته پس از آلودگي با ويروس خصوصيات لنفوسيت‌هاي T به ويژه لنفوسيت‌هاي T سايتوتوكسيك را از خود نشان دادند، يعني افزايش بيان ماركرهاي CD4 و به ويژه CD8 در آن‌ها ديده شد. نتيجه گيري با توجه به داده‌هاي كسب شده مي‌توان نتيجه گرفت كه سلول‌هاي بنيادي خونساز CD133+ جدا شده از خون بند ناف، با افزايش القاي بيان miR-146a و miR-150 ، توانايي تمايز به سمت لنفوسيت‌هاي T را دارند.

Abstract Background and Objectives Micro RNAs are a class of small non-coding RNAs which have been recently shown to play a crucial role in major cellular processes such as development and differentiation through post-transcriptional regulation. The role of these epigenetic elements has been also demonstrated in hematopoietic lineage differentiation and there is a large body of evidence that miR-150 and miR-146a are responsible for T lymphocyte differentiation. Our goal was to examine the effect of miR-150 and miR-146a overexpression in hematopoietic stem cells and its ability to differentiate these cells into a T lymphoid cell. Materials and Methods In this experimental study CD133+ stem cells were employed as hematopoietic stem cells and permanent overexpression of miR-150 and miR-146a was established. The differentiation progress was tracked by flowcytometry for lymphocyte markers such as CD4 and CD8. Moreover, expression of miR-146a and miR-150 by RT-PCR and quantitative real time PCR after 7 days was studied. Results The cells showed T lymphoid characteristics 7 days after transduction. CD4 and especially CD8 expression significantly increased. Conclusions In conclusion, miR-150 and miR-146a overexpression is an effective factor in T cytotoxic differentiation and they have the ability of directing CD133+ hematopoietic stem cells to express T lymphoid characteristics.