شناسايي، جداسازي، تخليص و بررسي طيف اثر باكتريوسين هاي چند سويه لاكتوباسيلوس بومي جدا شده از محصولات لبني ايران

Screening and characterization of bacteriocins produced by some Strains of Lactobacillus spp isolated from Iranian Dairy products

در اين مطالعه سويه هاي لاكتوباسيل جدا شده از فرآورده هاي شيري سنتي ايراني كه براي توليد باكتريوسين بر عليه 8 سويه استاندارد باكتري گرم مثبت، گرم منفي و مخمر با روش انتشاري غربالگري شدند. تعداد 8 سويه لاكتوباسيل بومي كه از نظر توليد مناسب تشخيص داده شدند، انتخاب و از بين آنها 2 سويه جهت مطالعه بيشتر در نظر گرفته شدند. باكتريوسين هاي توليد شده توسط 2 سويه فوق الذكر با استفاده از رسوب دهي با ايزوپروپانول و آمونيوم سولفات و سپس دياليز و كروماتوگرافي تخليص گرديد. آزمايش ژل الكتروفوز وجود باكتريوسين هايي با وزن مولكولي 45 تا 2/66 كيلودالتون را در اين سويه ها مشخص نمود. نتايج حاصله نشان داد سويه هاي جدا شده بومي قادر به توليد مواد باكتريوسيني هستند كه به ميزان بيشتر عليه ميكروكوكوس لوتيوس (Micrococcus luteus PTCC1169)، استافيلوكوكوس اپيدرميديسStaphylococcus epidermidis) PTCC1435 ) و باسيلوس سريوس (Bacillus cereus PTCC1247) و به مقدار كمتر بر روي ليستريا منوسيتوژنزListeria monocytogenes PTCC 1301)) موثر مي باشند. در بين ميكروارگانيسم هاي شاخص، ميكروكوكوس لوتيوس به عنوان حساسترين باكتري و كانديدا البيكنس (Candid albicans PTCC5027) به عنوان مقاوم ترين ارگانيسم شناخته شدند. اين مطالعه نشان داد، باكتريوسين هاي توليد شده توسط اين لاكتوباسيل ها قادر به مهار طيف وسيعي از ميكروارگانيسم هاي بيماري زاي موجود در مواد غذايي مي باشند و مي توانند به عنوان نگه دارنده هاي بيولوژيك در فرآورده هاي غذايي مورد استفاده قرار گيرند.

In this study, the inhibitory effects of bacteriocins of lactobacilli which were isolated from Iranian traditional dairy products was determined against known gram positive, gram negative and yeast by well diffusion technique. Among 8 isolates with higher capability of bacteriocin production, 2 isolates were selected for further investigations. The bacteriocins were purified by iso-propanol and ammonium sulfate precipitation following by dialysis and chromatography technique. The molecular weight of bacteriocins was determined as 45 to 66/2 KDa. by SDS-page electrophoresis. According to the results, the produced bacteriocins had more inhibition effect on Micrococcus luteus PTCC1169, Staphylococcus epidermidis PTCC1435 as well as Bacillus cereus PTCC1247 and with lesser degree of extent on Listeria monocytogenes PTCC 1301. Results also revealed that, Micrococcus luteus was the most sensitive bacterium among indicator bacteria, while Candid albicans PTCC 5027 identified as the most resistance organism. This research showed that, bacteriocins produced by lactobacilli isolated from traditional dairy products have high potency to be used against microbial pathogens and could be applied as bio-preservative in food products.