بررسي بيان ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز القا شونده در لنفوسيت‏هاي B بيماران مبتلا به نقص ايمني شايع متغير

The Study of AID Gene Expression in B Lymphocytes from CVID Patients

هدف: نقص ايمني شايع متغير شامل انواعي از اختلالات هتروژن سيستم ايمني بوده كه توسط نقص‏هاي ژنتيكي مختلف ايجاد مي‏شود. آنزيم سيتيدين دي‏آميناز القا شونده در پديده تعويض كلاس و بروز جهش‏هاي سوماتيك در مركز زايا نقش دارد؛ از اين رو به منظور روشن شدن نقش احتمالي اختلال در بيان ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز در بيماري زايي نقص ايمني شايع متغير، بيان اين ژن در افراد مبتلا بررسي شد. مواد و روش‏ها: سلول‏هاي تك هسته‏اي خون محيطي 21 فرد مبتلا و كنترل سالم جدا شد. سلول‏هاي جدا شده به منظور القاي بيان ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز توسط CD40L و اينترلوكين 4 تحريك شدند. پس از 5 روز RNA سلول‏هاي تحريك شده استخراج شده و بيان ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز القا شونده توسط RT-PCR بررسي شد. نتايج: نتايج آزمايش RT-PCR نشان داد كه پس از تحريك توسط CD-40L و اينترلوكين 4، mRNA ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز در تمام نمونه‏هاي مورد آزمايش بيان شده است. نمونه‏هاي كنترل نيز از نظر بيان mRNA ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز مثبت بود. نتيجه‏گيري: در مطالعه حاضر براي اولين بار بيان ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز القا شونده در لنفوسيت‏هاي B مبتلايان به نقص ايمني شايع متغير بررسي شد. با توجه به اين‏كه تمام بيماران مورد بررسي در اين مطالعه از نظر بيان mRNA ژن آنزيم سيتيدين دي‏آميناز طبيعي بودند و با توجه به اين‏كه يكي از مشكلات اصلي در بيماران نقص ايمني شايع متغير اختلال در پديده‏هاي مرتبط با مركز زايا و تمايز كامل لنفوسيت B است، مي‏توان نتيجه گرفت كه احتمالاً ساير مولكول‏هاي درگير در پديده تعويض كلاس در ايجاد بيماري نقش دارند. از آن‏جا كه شناخت نقص‏هاي ژنتيكي متنوع ايجاد كننده اين بيماري هتروژن مي‏تواند به دسته‏بندي مبتلايان به گروه‏هاي همسان‏تر و اتخاذ استراتژي درماني متناسب و اختصاصي براي هر زير‏گروه منجر شود، ضرورت ادامه اين گونه تحقيقات همچنان احساس مي‏شود.

Objective: Common variable immunodeficiency (CVID) is one of the most frequent cases of primary immunodeficiency. It is likely that this heterogeneous disease is caused by several distinct genetic disorders. The activation-induced cytidine deaminase (AID) enzyme is involved in class switching, somatic hypermutation (SHM) and processes associated with gene conversion in the germinal center. In order to clarify the possible role of AID in the pathogenesis of CVID, we have studied the AID gene expression in CVID patients. Methods: Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from 21 patients and healthy controls were isolated. The isolated cells were stimulated by CD40L and IL-4 to induce AID gene expression. After five days, total RNA from the stimulated cells was extracted and AID gene expression was investigated by RT-PCR. Results: RT-PCR results showed that after stimulation by CD-40L and IL-4, the AID gene was expressed in all of the samples. The control samples were also positive for AID gene mRNA expression. Conclusion: In this investigation we studied the expression of AID gene in CVID patientsʹ B lymphocytes for the first time. Regards to our results which showed that all patients normally expressed the AID gene mRNA and considering that one of the main problems in a number of CVID patients is disorders in phenomena related to the germinal center and complete differentiation of B lymphocytes, it can be concluded that possible defects in other molecules involved in class switching is responsible for this disease. Understanding the various genetic defects responsible for this heterogeneous disease could lead to its division into more homogenous subtypes with distinct therapeutic strategies, so further investigations is recommended.