ارزيابي كمّي بيان ناقلين درون‏دهي و برون‏دهي ايماتيب در بيماران مبتلا به لوسمي ميلوييدي مزمن (CML)

uantitative evaluation of Imatib efflux and influx transporters expression in Chronic Myeloid Leukemia (CML) patients

هدف: در اين مطالعه بيان ژن‏هاي MDR1 و hOCT1 در بيماران مبتلا به لوسمي ميلوييدي مزمن و افراد طبيعي با استفاده از RT-Real Time PCR مطالعه شد. مواد و روش‏ها: براي ارزيابي بيان ژن از سيستم Real-Time PCR با Syber Green Master-Mix استفاده شد. از تعداد 30 بيمار مبتلا به لوسمي ميلوييدي مزمن و 27 فرد سالم نمونه‏گيري شد. نتايج Real Time-PCR به روش سنجش نسبي ارزيابي شد. نتايج: نتايج تحقيق حاضر نشان داد كه MDR1 افزايش بيان معني‏داري در گروه بيماران تحت درمان با ايماتيب دارد و اين افزايش با پيشرفت بيماري مرتبط است و در فازهاي تسريع كننده و بلاستيك در مقايسه با فاز مزمن بيماري، افزايش بيان MDR1 مشاهده مي‏شود. در مقابل بيان hOCT1 تغيير معني‏داري نسبت به گروه طبيعي نداشت. نتيجه‏گيري: افزايش بيان MDR1 در غشاي سلول سرطاني باعث كاهش غلظت داخل سلولي دارو شده و فعاليت تيروزين كيناز BCR-ABL مهار نشده و سلول به حالت سرطاني باقي مانده و دچار مرگ برنامه‏ريزي شده نمي‏شود و بيماري به طرف فاز تسريع شده و بلاستيك پيشرفت مي‏كند. همچنين تغييرات در بيان hOCT1 به‏عنوان ناقل درون‏دهي داروي ايماتيب مي‏تواند بر غلظت داخل سلولي دارو و در نهايت، بر نتيجه درمان تاثيرگذار باشد كه در اين مطالعه بيان ژن hOCT1 متغير بود و تغييرات معني‏داري مشاهده نشد.

Objective: In this study quantitative expression of MDR1 and hOCT1 genes in CML patients and normal people were measured using Real-Time PCR. Materials and Methods: To study quantitative expression of these genes by real-time PCR, master-mix with syber green was used. Peripheral blood samples from 30 CML patients and 27 normal persons were harvested. Real-time PCR results were analyzed with relative quantification method. Result: This study showed that in the patients group who were under treatment with Imatib, MDR1 gene expression was increased which was statistically significant. This increase has a direct relation with disease progress. Gene expression in AP and BP patients was also higher than CP patients. In contrast, hOCT1 expression in patients group in comparison with normal group was not statistically significant. Conclusion: MDR1 increase in leukemic cell membrane results in the reduction of intra-cellular drug concentration. Thus, optimal concentration of drug for inhibition of BCR-ABL tyrosine kinase is not achieved which culminated in disease progression to AP and BP phases. Moreover changes in hOCT1 gene expression as an influx transporter of Imatib could affect intracellular concentration of drug and finally determine therapy outcome. However, in this study hOCT1 gene expression was variable and was not statistically significant.