جداسازي و شناسايي گونه هاي قارچي توليد كننده ليپاز از آب هاي ساحلي جنوبي درياي خزر به روش ITS-PCR

Isolation and characterization of lipase-producing fungi from southern coastal waters of the Caspian Sea by ITS-PCR

درياچه خزر يكي از ارزشمندترين اكوسيستم هاي جهان و داراي تنوع بالايي از گونه هاي مختلف قارچي با قابليت توليد آنزيم مي-باشد. ليپازها (تري آسيل گليسرول آسيل هيدرولازها) عمل هيدروليز و سنتز استرهاي تشكيل يافته از گليسرول و اسيدهاي چرب را بر عهده دارند. با اين كه ليپازها به فراواني در طبيعت يافت مي شوند ولي به دليل نقش عمده شان در توسعه تكنولوژي آنزيمي، تنها ليپازهاي ميكروبي از اهميت بالايي برخوردارند. هدف از انجام اين مطالعه، جدا سازي و شناسايي گونه هاي قارچي توليد كننده ليپاز از آب هاي سواحل جنوبي درياچه خزر بود. در اين مطالعه 25 گونه قارچي از سواحل جنوبي درياي خزر در بهار 1390 جداسازي شده و براي تعيين فعاليت ليپازي با استفاده از روش غربالگري بر روي محيط تري بوترين آگار مورد بررسي قرار گرفت. سپس چهار گونه قارچي توليد كننده آنزيم ليپاز انتخاب شده وPCR و تعيين توالي انجام شد. نتايج حاصل از تعيين توالي ژن ITS-5.8S rDNA نشان داد كه اين گونه-هاي جداسازي شده متعلق جنس هاي Cladosporium ، Glomerella و Phaeosphaeria بوده اند. از بين اين گونه ها، دو گونه قارچي Glomerella acutata و Cladosporium cladosporioides داراي بيشترين ميزان فعاليت ليپازي بودند.

Caspian Sea is one of the most valuable ecosystems in the world and contain a high diversity of fungal species with capable of producing the enzyme. Lipases (triacylglycerol acyl hydrolases, EC 3.1.1.3) catalyze the hydrolysis and the synthesis of esters formed from glycerol and long-chain fatty acids. Lipases occur widely in nature, but only microbial lipases are commercially significant. Microbial lipases are currently receiving much attention with the rapid development of enzyme technology. The aim of this study was isolation and identification of lipase-producing fungi from the coastal waters of the Caspian Sea. In this study, 25 fungal species were isolated from southern coasts of the Caspian Sea in spring 2011 and tested to determine their lipolytic activity by screening techniques on tributyrin agar media. Four lipase-producing fungi were selected and their PCR identification and sequencing were carried out. Determination of the nucleotide sequencing of the ITS-5.8S rDNA gene showed that these isolated species belonged to genera Cladosporium, Glomerella and Phaeosphaeria. Among them, two species of Glomerella acutata and Cladosporium cladosporioides showed higher lipase activity.