شيوع ژن هاي شيگا توكسين، اينتيمين و هموليزين در سويه هاي اشريشياكلي O157:H7 از نمونه هاي گوشت چرخ كرده كارخانجات صنعتي شهرستان شيراز

Prevalence of Shiga Toxins, Intimin and Hemolysin Genes of Escherichia coli O157:H7 Strains from Industrial Ground Meat in Shiraz

چكيده: اشريشياكلي سروتيپO157:H7 يكي از عوامل اصلي ايجادكننده مسموميت غذايي و بيماري هايي مانند كوليت خونريزي دهنده و سندرم اورمي هموليتيك است. عفونت هاي انساني ناشي از اين باكتري در اثر مصرف آب و غذاي آلوده ايجاد مي شوند. هدف اين پژوهش، ارزيابي ژن هاي بيماري زاي stx1، stx2، A eae و hly باكتري اشريشياكلي O157:H7در نمونه هاي گوشت چرخ كرده شهرستان شيراز مي باشد. روش بررسي: در اين پژوهش 504 نمونه گوشت چرخ كرده از سه كارخانه، به مدت يكسال جمع آوري و در محيط كشت اشريشياكلي براث واجد نووبيوسين در دماي C?37 غني سازي شد. سپس از محيط كشت هاي CT-SMAC و VRBA به منظور بررسي تخمير سوربيتول و لاكتوز و از محيط كروموآگار براي بررسي فعاليت بتاگلوكورونيدازي باكتريهاي جداسازي شده استفاده گرديد. با استفاده از آنتي سرم اختصاصي، باكتري اشريشياكلي O157:H7 تاييد و با روش Multiplex PCR وجود ژن هايstx1 ، stx2، eaeA و hly مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج: از مجموع نمونه هاي گوشت مورد ارزيابي، 466 نمونه در محيط CT-SMAC داراي كلني هاي سوربيتول منفي بودند(46/92%). پس از انجام تست هاي تاييدي از 2(39/0%) نمونه، باكتري اشريشياكلي O157:H7 جداسازي گرديد كه در مجموع از كل نمونه ها 39/0% داراي ژن هاي stx1 وeaeA و 19/0% داراي ژن stx2 بودند. نتيجه گيري: از آن جايي كه اشريشياكلي O157:H7 يكي از نگراني هاي اساسي بهداشت و سلامت گوشت محسوب مي گردد، بايستي مورد توجه دايمي قرار گيرد. راه هاي پيشگيري مي تواند موجب كاهش گاوهاي آلوده واجد اين باكتري و آلودگي گوشت در هنگام كشتار دام و خرد كردن گوشت شود.

Introduction: Escherichia coli O157:H7 is one of the major foodborne illness and sporadic case of human disease, hemorrhagic colitis and hemolytic-uremic syndrome. The purpose of this study is to survey the prevalence of Escherichia coli O157:H7 virulence genes from ground meat in Shiraz. Methods: In this research 504 samples of ground meat were collected from three main factories of meat products and enriched in Escherichia coli broth with novobiocin medium in 37?C. Fermentation of sorbitol and lactose and B-glucoronidase activity of isolated strains were examined by CT-SMAC, VRBA and chromogenic media respectively. Then isolation of E.coli O157:H7 have been confirmed with the use of specific antisera and with multiplex PCR method presence of E.coli O157:H7 virulence genes including: stx1, stx2, eaeA, hly has been analysed. Results: Out of specimens that have been supplied, 466 sorbitol negative bacteria were isolated in CT-SMAC medium(92.46%). The stx1 and eaeA genes were diagnosed in two case of these samples(0.39 %) and stx2 gene was detected in one case(0.19%) of isolated E.coli O157:H7 strains. Conclusion: E.coli O157:H7 will continue to be an important public health concern as long as it contaminates meat. Preventive measures may reduce the number of cattle that carry it and the contamination of meat during slaughter and grinding.