بررسي غلظت هايDMSO بر بيان ژن گاماگلوبين در سلول هاي هيبريد Hu11

Evaluating the effect of DMSO concentrations on -globin expression in Hu11 cells

سابقه و هدف: بررسي اثر موتاسيون ها در توليد هموگلوبين و شناخت مكانيسم هاي توليد و تبديل گاما به بتاگلوبين در درمان بتاتالاسمي مهم مي باشد. رده سلولي هيبريد Hu11 يكي از رده هاي سلولي مناسب در اين زمينه است كه داراي لوكوس بتاگلوبين انساني در داخل سلول هاي اريتروييد موشي است. سلول هاي MEL در حضور دي متيل سولفاكسايد (DMSO) تمايز مي يابند، با اين حال ميزان القاي گاماگلوبين در سلول هاي Hu11 در حضور دي متيل سولفاكسايد هنوز تعيين نشده است. در تحقيق حاضر اثر غلظت هاي متفاوت DMSO بربيان ژن گاماگلوبين انساني در رده سلول هاي Hu11 بررسي شده است. روش بررسي: در اين مطالعه، سلول هاي Hu11 در غلظت هاي متفاوت از DMSO كشت داده شد و ميزان توليد هموگلوبين و بيان ژن گاماگلوبين از طريق Real-time PCR ارزيابي گرديد. يافته ها: توليد هموگلوبين در سلول هاي Hu11 در غلظت هاي 1 و2 درصد DMSO به ترتيب 5 و 10 برابر افزايش يافت. هم چنين در آزمايش Real-time PCR ميزان بيان ژن گاماگلوبين در اين غلظت هاي DMSO به ترتيب 66 و 296 درصد افزايش يافت. نتيجه گيري: سلول هاي هيبريدHu11 در حضور DMSO روند تمايزي را طي مي كنند و ميزان هموگلوبين و بيان ژن گاماگلوبين در آنها افزايش مي يابد. اين سلول ها مي توانند در مطالعاتي كه به منظور افزايش بيان ژن گاما در ژن درماني بتا تالاسمي صورت مي-پذيرد مفيد باشند.

Background: Understanding of the mechanisms involved in ?- to B-globin switching may be important for development of treatment options for b-thalassemia. Such studies require the availability of relevant cellular model systems. One such cell type is Hu11, a mouse erythroleukemia (MEL) cell line containing the human b-locus. MEL and Hu11 cells differentiate in the presence of the chemical dimethyl sulfoxide (DMSO). Nevertheless, levels of ?-globin induction in Hu11 cells after DMSO treatment have not been determined. In the present study, we determined ?-globin levels in Hu11 cells after treatment with various DMSO concentrations. Materials and methods: Hu11 cells were cultivated in various DMSO concentrations and the levels of ?-globin were determined by real-time PCR. Results: Our study showed that hemoglobin in Hu11 cells treated with 1% and 2% DMSO was increased by approximately 5 and 10 folds. Moreover real-time PCR results showed that g-globin levels using the indicated DMSO levels were increased by 66 and 298 folds, respectively. Conclusion: Hu11 cells differentiate in the presence of DMSO, and in doing so, their ?-globin levels are increased. Therefore these cells can be used to study the mechanisms of ?-globin induction. Such studies may be beneficial for the treatment of B-thalassemia.