بررسي اثرات دي بنزو -18- كراون-6 بر كلني زايي سلولهاي مغز قرمز استخوان موش نژاد Balb/C در شرايط in vitro

Effect of Dibenzo-18-crown-6 on haematopoitic cells colony formation of mouse bone marrow

سابقه و هدف: باتوجه به اثرات بيولوژيكي شناخته شده كراون اترها ، انجام تحقيقات گسترده در جهت كاربردي كردن اين تركيبات در صنايع دارويي ضروري به نظر مي رسد. هدف از اين پژوهش، بررسي تاثير دي‌بنزو-18-كراون-6 بر كلني زايي سلول هاي مغز قرمز استخوان موش در محيط كشت و مكانيسم احتمالي عملكرد آن بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي، از سلول هاي مغز قرمز استخوان موش نژاد Balb/C به عنوان منبع سلول هاي بنيادي خونساز استفاده شد. كشت سلول هاي مغز قرمز استخوان به صورت نيمه جامد در حضور غلظت هاي متفاوت كراون اتر، cAMP، PO4H2Na و PO4H2K در شرايط in vitro انجام گرفت. يافته ها: اثرات مهاري قابل ملاحظه‌اي بر كلني‌زايي سلول هاي مغز قرمز استخوان در تمامي‌غلظت‌هاي كراون اتر مشاهده شد. اين اثرات مهاري در غلظت 80 ميلي گرم بر ميلي ليتر كراون اتر به حداكثر رسيد و هيچ كلني در محيط كشت مشاهده نشد. اثرات مهاري ايجاد شده بوسيله كراون اتر در حضور cAMP با غلظت 6-10x 10 مول، PO4H2Na با غلظت 6-10x 10 مول و PO4H2K با غلظت 6-10x5 تا حدودي بر طرف شد، اما به ميزان كنترل فاقد كراون اتر نرسيد. استفاده از روش HPLC براي تعيين مقدار باقي مانده كراون اتر در محيط كشت مشخص كرد كه غلظت كراون اتر در محيط كشت در ساعت ششم از شروع كشت به صفر مي‌رسد. نتيجه گيري: اين تحقيق نشان داد كه اثر كراون اتر در مهار كلني‌زايي سلولهاي مغز قرمز استخوان احتمالا از دو طريق كاهش ميزان كاتيون ها و تغيير در فيزيولوژي غشا كه خود منجر به اختلال در مسير سيگنالينگ cAMP مي‌شود، اعمال مي شود.

Background: Known biological effects of crown ethers influence us to investigate its effect in human body and use in drug production. The aim of this study was to evaluate the effects of Dibenzo-18-crown-6 on colony formation of bone marrow cells of mouse in culture medium and to find the probable mechanisms of the process. Materials and Methods: In this experimental study, red bone marrow cells of mouse (Balb/C) were used as source of haemapoietic stem cells. Culture of red bone marrow cells was done in the form of semi solid in the presence of different concentrations of crown ether, cAMP, PHO4H2K and PO4H2Na. Results: Different concentrations of crown ether have significant inhibitory effects on colonizing of red bone marrow cells. The maximum inhibitory effect was observed in concentration of 80 mg/ml crown ether and no colony was found. The inhibitory effects of crown ether was diminished in the presence of cAMP with concentration of 10× 10-6 mol , PO4H2Na with concentration of 10× 10-6 mol and PO4H2K with concentration of 5×106 mol, but it couldn’t achieve the level of control group without presence of crown ether. HPLC method demonstrated that remaining level of crown ether reached to zero after sixth hour. Conclusion: The inhibitory effects of crown ether in control of colonizing the red bone marrow cells occur via decreasing of cations value and changing the physiological function of membrane resulting disorder in the cAMP signaling pathway.