القا سنتز محافظت كننده نوروني BTGF در آستروسيتها با مهار اختصاصي آنزيم گليكوژن سنتاز كيناز"( (GSK3B

The effect of BIO, a specific GSK3-Β inhibitor, on the expression of neuroprotective factor TgfB in cultured astrocytes

آستروسيتها عمده سلولهاي گليال تشكيل دهنده سيستم عصبي مركزي و با تعداد تقريبي ده برابر نسبت به نورونها داراي عملكرد حفاظت از نورونها در برابرآسيب ديدگيها هستند. يافته هاي متعددي ارتباط مستقيم بين مرگ آستروسيتها وپيشرفت سريع بيماريهاي neurodegenerative را نشان مي دهند. آنزيم گليكوژن سنتاز كيناز"("(GSK3B به عنوان مولكول كليدي نقش مهمي را در كنترل بسياري از پروسه هاي تكوين نظير تمايز، مهاجرت و مرگ سلولي ايفا مي كند. مهار GSK3B در فعال شدن مسيرهاي پيام رساني درون سلولي از جمله مسيرهاي Wnt و PI3K-Aktنقش اساسي داشته و افزايش ميزان آن باعث اختلال درمسيرهاي پيام رساني و بروز بيماريهاي neurodegenerative مانند آلزايمر و پاركينسون ميشود. در اين تحقيق به منظور بررسي نقش احتمالي GSK3B در ترشح فاكتور محافظت كننده نوروني TGFB از آستروسيتها درمحيط in vitro، از BIO به عنوان مهاركننده اختصاصي BGSK3 استفاده گرديد و تاثير آن بر ميزان بيان TGFB1 وTGFB2 مورد بررسي قرار گرفت. سلولهاي آستروسيت ناحيه كورتكس مغز نوزاد 2-1 روزه موش صحرايي نژاد Wistar با غلظتهاي ?M1، ?M 5/0 و ?M1/0 BIO تيمار شدند و پس از 48 ساعت به وسيله تريپسين 25/0 درصد جدا، RNA آنها استخراج و جهت real time RT-PCR مورد استفاده قرار گرفت. نتايج آزمايشات اين تحقيق نشان داد كه BIO سنتز TGFB1 وTGFB2 در سلولهاي آستروسيت را در مقايسه با سلولهاي شاهد افزايش داده است. اين امر مويد آن است كه مهار GSK3B در آستروسيتها براي عملكرد آنها در محافظت از نورونها ضروري است.

Astrocytes are the most important glial cells of the central nervous system, ten times as much as neurons and with the ability of neuroprotection against injuries, ischemia, etc. Apoptosis of the astrocytes therefore leads to disease progression in neurodegenerative pateints such as Alzheimerʹs and Parkinsonʹs diseases. Investigations on possible signaling pathway (s) involved in neuron death suggest that GSK3-B "glycogen synthase kinase-3B", a key molecule of the Wnt and PI-3 kinase signaling pathways, is considerably increased in neurodegenerative diseases. In this study we sought to determine if the expression of neuroprotective factors such as TGFB1 and TGFB2 in cultured astrocytes is altered by inhibition of GSK3-B. Different concentrations of BIO, a specific inhibitor of GSK3-B (0.1 µM, 0.5 µM and 1µM) were therefore used. The treated and control astrocytes were isolated after 48 hours and monitored for the expression of TGFB1mRNA and TGFB2mRNA using real-time RT-PCR. Our results show that the BIO treated cells express much higher amounts of TGFB1 and TGFB2 in comparison with the control cells. The increased expression of TGFBs following the inhibition of GSK3-B points at the involvement of GSK3-B in neuroprotective activity of astrocytes.