بيان ماركرهاي سطحي در سلولهاي بنيادي مزانشيمي مشتق شده از مغز استخوان

Surface Markers Expression in the Mesenchymal Stem Cells Derived from Bone Marrow

چكيده زمينه و هدف: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي براي اولين بار به وسيله فردنستين و همكاران از مغز استخوان جدا شدند. جهت اثبات مزانشيمي بودن سلول‌ها علاوه بر خاصيت چسبندگيآنها، از ماركرهاي سطحي استفاده مي‌شود. هدف اين مطالعه كشت و جداسازي سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان موش و بيان برخي ماركرهاي سطحي در سلول‌هاي حاصل بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي سلول‌هاي مغز استخوان از استخوان‌هاي ران و درشت ‌ني موش‌هاي NMRI جدا شدند. سلول-هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان بر اساس خاصيت چسبندگي آنها به كف ظرف كشت جداسازي شدند. جهت اثبات مزانشيمي بودن سلول‌ها علاوه بر خاصيت چسبندگي آنها، ماركرهايCD73،CD44 ،CD90 ،CD31 ،CD45 وCD29 بعد از پاساژ چهارم با روش فلوسيتومتري بررسي شدند. يافته‌ها: در كشت اوليه، جمعيت هتروژني از سلول‌ها پهن، دوكي و چند وجهي بودند. در پاساژهاي بعدي تعداد سلول‌هاي دوكي شكل افزايش يافت، به طوري كه در پاساژ سوم بيشتر سلول‌ها دوكي شكل بودند. آناليز فلوسايتومتري ماركرهاي سطحي نشان داد كه سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان حاصل از پاساژ چهارم ماركرهايي CD44 ، CD73 وCD29 را به ميزان بالا و ماركرهايي CD31،CD45 وCD90 را به ميزان كم بيان مي‌كنند. نتيجه‌گيري: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق شده از مغز استخوان داراي تعدادي ماركر مثبت هستند كه به ميزان بالايي بيان مي‌شوند و نيز تعدادي ماركر منفي هستند كه به ميزان كمي بيان مي‌شوند. ميزان بيان اين ماركرها، مزانشيمي بودن اين سلول‌ها را اثبات مي‌كند.

Background and aim: Mesenchymal stem cells were separated from bone marrow by Friedenstein et al. for the first time. In addition to their cohesion, mesenchymal properties of the cells were proven by surface markers. The aim of this study was to isolate mesenchymal stem cells from mouse bone marrow cultures and some surface markers in the obtained cells were expressed. Methods: In this study, bone marrow cells in the femur and tibia bones were isolated from NMRI mice. Bone marrow mesenchymal stem cells were isolated to the bottom of culture dish based on cohesion properties. In addition to their cohesion, mesenchymal properties of the cells were proven by CD73, CD44, CD90, CD31, CD45 and CD29 markers, after the fourth passage using flow cytometry. Results: In the primary culture, a heterogenous population of flattened, spindle and multi-faceted cells were observed. Spindle-shaped cells increased in later passages, so that almost all of third passage cells were spindle-shaped. Flow cytometry analysis of surface markers revealed high level mesenchymal stem cells from the fourth passage markers CD44, CD73 and CD29, and, low level of CD31, CD45 and CD90 markers. Conclusion: It can be concluded that MSCs derived from bone marrow mouse have some positive and negative surface markers with high and low expression, respectively. The expression rate of these markers proves the mesenchymal properties of cells. Keyword: Bone Marrow, Mesenchymal Stem Cells, Surface Markers