جداسازي و شناسايي باكتري كرايزوباكتريوم آكواتيكوم (Chryseobacterium aquaticum) از خوردگي باله‌ي دمي و زخم ساقه‌ي دمي ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان (Oncorhynchus mykiss)

Isolation and identification of Chryseobacterium aquaticum from caudal fin rot and peduncle erosion in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)

در ماهيان قزل‌آلاي رنگين‌‌كمان (Oncorhynchus mykiss) پرورشي يك پرورش ماهي مداربسته زخم‌هاي وسيعي در پوست و باله‌‌ي دميديده شد كه منجر به خوردگي بسيار شديد و زخم پيش‌رونده در ناحيه‌ي ساقه‌ي دمي و مرگ ماهيان پرورشي شد. از ماهيان داراي زخم در ناحيه‌ي دمي، چند ماهي جمع‌آوري و در كيسه‌هاي پلاستيكي محتوي آب به آزمايشگاه منتقل شد. به‌منظور جداسازي خالص باكتري از ماهي‌هاي بيمار، نمونه‌گيري از زخم‌ها پس از شستشو با سرم فيزيولوژي و سپس از كبد و طحال به‌طور استريل انجام شد. نمونه‌ها در محيط كشت مغذي و همچنين محيط كشت كم‌غذا كشت داده شده و باكتري‌هاي رشد يافته مورد شناسايي قرار گرفتند. آزمايش‌هاي بيوشيميايي و همچنين واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز (PCR) براي تشخيص باكتري جدا شده همراه با مقايسه‌ي خصوصيات فيزيولوژيكي، بيوشيمايي و مولكولي باكتري‌هاي گزارش شده مورد استفاده قرار گرفت. خصوصيات ژنتيكي با استفاده از روش PCR و تعيين نهايي ترادف محصول مورد نظر با ديگر موارد مشابه موجود در بانك ژن مقايسه شد؛ تا هرگونه قرابت و اختلاف بين اين جدايه با ساير موارد مشابه مشخص گردد. نتايج به‌دست آمده نشان داد قرابت بسيار زيادي (بيش از 99 درصد) بين نمونه‌ي حاضر با باكتري كرايزوباكتريوم آكواتيكوم (Chryseobacterium aquaticum) گزارش شده‌ي قبلي، وجود دارد. اين باكتري به بيشتر آنتي‌بيوتيك‌هاي موجود مقاوم بود. از پرمنگنات پتاسيم براي درمان ماهيان بيمار در اين واحد پرورش ماهي استفاده شد. كاهش جمعيت ماهي در اين واحد پرورشي و بهبود شرايط محيطي با اضافه كردن بيشتر آب تازه به سيستم مدار بسته در پيشگيري از بيماري موثر بود.

Some cultured rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in a recirculating system farm showed caudal fin rot and peduncle erosion resulted in fish mortality. Fish with peduncle erosion were collected and transferred in plastic bags with water to fish health laboratory unit. After washing with PBS, aseptic samples were taken from fish caudal peduncles. Samples from liver and spleen of the fish were also collected. All samples were cultured both on nutrient as well as low nutrient media for bacterial isolations and examined up to 72h. Bacterial isolates in this research was distinguished by physiological, biochemical and molecular tests. Using PCR, the genotypic properties of the isolate were compared with similar isolates registered in the gene bank. Results showed 99% phylogenetic similarity with a previously reported Chryseobacterium aquaticum. This isolate showed resistance to most of conventional antibiotics. Diseased fish were treated using potassium permanganate. Reduction of fish population in each unit and improvement of the environmental condition for fish by adding more freshwater to the recirculation system were effective to control the disease.