اثر حفاظتي مورفين بر مرگ سلولي القا شده در كشت بدون سرم در سلول هايPC12

Protective Effects of Morphine on Serum Deprivation-induced Cell Death in PC12 Cells

سابقه و هدف: مورفين يكي از داروهاي مهم در درمان درد بوده و بعنوان تنظيم كننده بقا يا مرگ سلولي در سلول هاي عصبي و توموري مي باشد. بيشتر مطالعات پيشنهاد مي كنند كه مورفين باعث القا آپوپتوزيس در سلول هاي عصبي مي شود اما در مطالعات ديگري بيان شده كه مورفين اثرات مهاري برعليه مرگ سلولي القا مي كند. در اين مطالعه اثر غلظت هاي مختلف مورفين بر مرگ سلولي القا شده در سلول هاي 12PC تحت شرايط كشت بدون سرم بررسي شد. مواد و روشها: سلول ها در محيط كشت RPMI1640 همراه با 2/0 درصد BSA كشت داده شدند. سلول ها به دو گروه (گروهI: بدون پيش تيمار با نالتروكسان و گروه II: همراه با پيش تيمار نالتروكسان) تقسيم شدند. در هر گروه سلول ها همراه با غلظت هاي مختلف (تيمار 1: 12-10، تيمار 2: 10-10، تيمار 3: 8-10، تيمار4: 6-10، تيمار 5: 4-10 و تيمار 6: 0مولار) مورفين تيمار شدند. ميزان سيتوتوكسيسيتي از طريق اندازه گيري لاكتات دهيدروژناز و ميزان مرگ سلول ها از طريق رنگ آميزي افتراقي Hoechst/PI اندازه گيري شد. يافته ها: بعد از 6 روز تمامي سلول هاي كنترل در اثر عدم وجود سرم كاملا دچار آپوپتوزيس (100%) و مرگ سلولي شدند (05/0p < ). ارزيابي ميزان سيتوتوكسيسيتي و مرگ سلول ها نشان داد كه مورفين در تمامي غلظت ها ميزان سيتوتوكسيسيتي و مرگ سلول هاي القا شده توسط شرايط بدون سرم در سلول هاي PC12 مهار مي كند (05/0p < ). نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه مورفين بعنوان يك فاكتور كمكي با مكانيسم وابسته به رسپتورهاي اپيوييدي منجر به مهار مرگ سلولي در سلول هاي 12PC در شرايط كشت بدون سرم مي شود.

ABSTRACT BACKGROUND AND OBJECTIVE: Morphine is the most effective pain-relieving drugs in the management of pain. Morphine modulates survival and apoptosis of neural and tumoral cells. Some data suggest that morphine induces apoptosis in neurons, while other evidence shows that morphine could have beneficial effects against apoptosis. The present study was undertaken to evaluate the effects of different concentrations of morphine on serum deprivation-induced cell death in PC12 cells METHODS: In this study PC12 cells (Pastour Insititue, Iran) were cultured in RPMI1640 culture medium supplemented with 0.2% BSA. Cells were divided to 2 groups (group I: cells unpretreated with naltrexone; group II: cells pretreated with naltrexone). There were six treatments in each group. Cells treated with different concentrations (The treatments were: treatment1: 10-12, treatment 2: 10-10, treatment 3: 10-8, treatment 4: 10-6, treatment 5: 10-4, Treatment 6: 0.0 M,) of morphine. The percentage of cytotoxicity by lactate dehydrogenase assay and the percentage of cell death by Hoechst/PI differential staining of each group were assessed. FINDINGS: After 6 days, serum deprivation result in full cell death (100%) in PC12 cells (p < 0.05). The percentage of cytotoxicity and cell death assessment showed that morphine at different concentration inhibited serum deprivation-induced cell death and cytotoxicity in PC12 cells (p < 0.05). CONCLUSION: Our results concluded that morphine with an opioid receptor-depended as a growth factor lead to inhibition of serum deprivation-induced cell death in PC12 cells.