ارزيابي اثرات پرده‌ي آمنيون بر ميزان زنده بودن و تكثير سلول‌هاي سرطاني در محيط آزمايشگاهي

In vitro Evaluation of the Effects of Amniotic Membrane on Viability and Proliferation

زمينه و هدف: اخيراً پرده‌ي آمنيون به‌عنوان يك بافت طبيعي با خواص ضد سرطاني معرفي شده است ولي در مورد مكانيسم اين خواص مطالعات محدودي وجود دارد. در اين مطالعه در نظر بود تا تاثير محيط كشت روي پرده‌ي آمنيون بر روي زيست پذيري سلول‌هاي سرطاني در دوزهاي مختلف و ميزان آپوپتوز بررسي شود. روش بررسي: پرده‌ي آمنيون حاصل از سزارين‌هاي انتخابي به‌صورت بالا قرار دادن سطح اپي تليال به مدت 24 ساعت كشت داده شد. پس از آن محيط كشت روي پرده‌هاي آمنيون در حجم‌هاي مختلف به محيط كشت سلول‌هاي سرطاني اضافه شد. بعد از 24 ساعت ميزان زيست پذيري سلول‌هاي سرطاني با آزمون MTT و آپوپتوز آن‌ها به‌عنوان مكانيسم احتمالي با آزمون TUNEL بررسي شد. نتايج به‌صورت ميانگين ± انحراف معيار ارايه و با آزمون ANOVA يكطرفه بررسي شد. يافته‌ها: پس از 24 ساعت، آزمون MTT نشان داد كه محيط كشت پرده‌ي آمنيون به‌صورت معناداري باعث كاهش زيست پذيري سلول‌هاي سرطاني در مقايسه با گروه كنترل گرديد و اين اثر وابسته به دوز بود. بررسي آزمون TUNEL نشان داد كه سلول‌هاي سرطاني بر اثر آپوپتوز به صورت وابسته به دوز از بين رفته‌اند كه اين ميزان در غلظت‌هاي بالاتر محيط پرده‌ي آمنيون بيشتر است. نتيجه‌گيري: با توجه به اثر وابسته به دوز پرده‌ي آمنيون بر روي سلول‌هاي سرطاني و القاي احتمالي آپوپتوز، مي‌توان با مطالعات بيشتر پرده‌ي آمنيون را به‌عنوان يك انتخاب مناسب در درمان سرطان در نظر گرفت. واژگان كليدي: پرده‌ي آمنيون، سلول سرطاني، آپوپتوز، زيست‌پذيري

Background and Objective: Though amniotic membrane has recently been introduced as a natural tissue with anti-cancer properties, there are inadequate studies about involved mechanisms. In this study, the effect of amniotic membrane culture supernatant on viability of cancer cells via applying different doses was evaluated. Apoptosis as a possible mechanism of inducing cancer cell death by amniotic membrane was also investigated. Materials and Methods: Amniotic membranes prepared from placentas in Caesarian sections which were high in epithelial level were cultured for 24 hours. Then, medium was collected and added in different volumes to the culture of cancer cells. After 24 hours, the viability of cancer cells was evaluated by the MTT assay. Apoptosis of cancer cells as a possible mechanism was assessed with the TUNEL assay. Analysis of data was performed using one-way Anova and post-Tukey test. Results: After the lapse of 24 hours, the outcome of the MTT assay revealed that supernatant of amniotic membrane significantly led to a decrease in the viability of cancer cells in comparison to the control group. Meanwhile, the TUNEL assay showed that induction of death in cancer cells was possibly through apoptosis which was dose-dependent. Conclusion: Owing to the dose-dependent effect of amniotic membrane on cancer cells and possible induction of apoptosis, more research is in demand to introduce amniotic membrane as a proper choice in the treatment of cancer. Keywords: Amnion, Cancer cells, Apoptosis, Viability