بررسي ژن GRA6 در تفريق ژنوتيپ‌هاي توكسوپلاسما گونديي با استفاده از روش PCR- RFLP در جنين‌هاي سقط شده گوسفندي منطقه اردبيل

Survey on GRA6 gene in differentiating Toxoplasma gondii genotypes, using PCR-RFLP method, in sheep aborted fetuses in Ardabil area, Iran

توكسوپلاسما گونديي تك ياخته درون سلولي ايزوسپورايي در حيوانات مهره دار خونگرم است كه از نظر بهداشتي و اقتصادي براي انسان و براي حيوانات اهلي و وحشي اهميت فراواني دارد. مراحل تكاملي اين انگل در دو ميزبان طي مي شود، بدين صورت كه ميزبان نهايي انگل گربه سانان هستند كه اووسيست دفع مي كنند . انسان و بسياري از حيوانات به عنوان ميزبان واسط تصادفي عمل مي كنند و در اندامهاي مختلف بدن آنان كيست نسجي تشكيل مي شود. اين انگل موجب سقط جنين در انسان و در برخي حيوانات علفخوار مي شود. از آنجا كه ميزان آلودگي بره هاي سقط شده منطقه اردبيل به توكسوپلاسما گونديي با روش PCR بيش از 75 درصد بوده است و از طرفي تعيين ژنوتيپ‌هاي اين تك ياخته از اهميت ويژه اي برخوردار است به همين جهت از ژن GRA6 براي تعيين تيپ هاي انگل و پاتوژنيسته آن با روش PCR-RFLP در 75 جنين سقط شده گوسفند مورد استفاده قرار گرفت، اما در هيچ كدام از آزمايشات ژن مزبور تكثير نيافت و نتيجه مثبت حاصل نشد. در آزمايش زيست سنجي كه با تزريق نمونه هايي از مغز جنين‌هاي سقط شده به موش‌هاي آزمايشگاهي صورت گرفت، هيچگونه آثاري از انگل توكسوپلاسما گونديي مشاهده نشد. در نهايت چنين بنظر مي‌رسد كه در جنين‌هاي سقط شده ممكن است احتمالا بدليل تعداد كم انگل توكسوپلاسما ژن GRA6 تكثير نيا فت و نيز اين بيماري بعلت وجود تيپ غير حاد موشي توكسوپلاسما نقشي در سقط جنين گوسفندان اردبيل نداشته باشد.

Toxoplasma gondii, is an isosporean intracellular protozoa in warm blooded animals. Its importance relies on public health hazards and significant economical losses in man and some domestic and wild animals. Its life cycle develops in two hosts: Cat and other felids are definitive hosts which produce oocyts and man and many domestic and wild animals are the accidental intermediate hosts which harbor tissue cysts in their bodies. This parasite causes abortion in man and some herbivorous animals, too. Because the infection rate of toxoplasmosis in sheep aborted fetuses of Ardabil was over 75 %, by PCR method, we decided to use GRA6 gene of Toxoplasma in order to reveal the strains and their pathogenicity in this area. All 75 fetuses were tested by PCR-RFLP method. However, this gene was not amplified in none of the fetuses. Meanwhile, results of bioassay, following intraperitoneal injection of fetal brains to albino mice, revealed that no tissue cyst developed in mice brains. In conclusion, it is probable that the amount of Toxoplasma organisms was not sufficient for the gene amplification. In addition, it seems that the low number of the parasite as well as the presence of non-virulent murine strain of Toxoplasma, may not be the cause of sheep abortion in Ardabil area.