استخراج سلولهاي بنيادين از بافت پالپ دندانهاي شيري انسان و نشاندارسازي آنها

Effect of Tc99m Labeling on The Survival Rate of Dental Pulp Stem Cells

خلاصه: سابقه و هدف: سلول هاي پالپ دندان شيري انسان توانايي تكثير و تمايز بالايي از خود نشان مي دهند و مي توان با تمايز اين سلولها به سلول هاي شبه ادنتوبلاست و استيوبلاست به بازسازي ساختمان از دست رفته دندان كمك كرد. براي رديابي سلول ها نيز ميتوان از روش هاي مختلفي استفاده كرد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه آزمايشگاهي كه با رعايت تمامي مسايل اخلاقي انجام يافته است، نمونه هاي دنداني از دندانهاي شيري در حال افتادن كودكان 6 تا 11 ساله اي جمع آوري شدكه سابقه هيچ گونه بيماري سيستميك و خطرناكي نداشتند. براي تسريع در جداسازي سلولها از دو روش آنزيمي و غيرآنزيمي استفاده شد. جهت رديابي سلولها ، 10000 سلول جدا شده از بافت پالپ با 25 ميلي كوري تكنسيم مخلوط شد و ميزان فعاليت سلولي و محيط، جداگانه اندازه گيري شدند. نتايج: يافته هاي كشت سلولي مطالعه حاضر نشان داد كه سلولهاي جدا شده از بافت پالپ كلوني هاي مشتق از تك سلول تشكيل داده و به شكل واحدهاي كلوني متشكل از سلولهاي شبه فيبروبلاست رشد مي كنند. رنگ آميزي آليزارين رد در اين سلولها نشان دهنده بنيادين بودن اين سلولها وتمايز آنها به استخوان بود. تمايز آديپوسيتي سلول هاي مزانشيمي استخراج شده از بافت پالپ بااستفاده از رنگ آميزي اويل رد او نيز بيانگر تمايز آنها به بافت چربي بود. تماس سلولها با تكنسيم موجب نابودي آنها و در برخي از موارد فعاليت آنها را به شدت كاهش داد. به طوري كه در مدت زمانهاي تماسي 1 , 6,3 ,24, 48 ساعت، ميزان بقاي سلولها به ترتيب5/95, 5/85, 4/77, 4/68 و 3/57 درصد بود. نتيجه گيري: به نظر مي رسد سلول هاي بنيادين پالپ دندان قابليت قابل توجهي در تبديل به بافت استخوان و چربي دارند و نشاندار سازي اين سلول ها با تكنسيم 99M در طي زمان موجب كاهش قابل توجه بقا مي شود. كليد واژه ها: سلول بنيادي، پالپ دندان، تكنسيم تي سي 99 ام

Abstract: Background and Aim: Human dental pulp stem cells have substantial proliferative and differentiation potential. The isolated stem cells or progenitor cells of the pulp can differentiate into odontoblasts or /and osteoblast-like cells and aid in repair as well as reconstruction of tooth structure. Several ways have been introduced for isolation and tracing of these cells. The aim of this study was to isolate mesenchymal stem cells from deciduous dental pulps as well as labeling them with Technetium (Tc99m) to investigate the effect of Tc labeling on the survival rate of stem cells. Materials and Methods: In this experimental study, exfoliated deciduous teeth of 6-11 year old children without any history of systemic disease were collected. Enzymatic and non-enzymatic methods were used to expedite cell isolation and isolated cells (10000) from dental pulp were mixed with 25 millicurie of Tc for tracing purposes. Individual cell activity as well as culture medium activation was evaluated separately afterwards. Data was analyzed using ANOVA statistical test. Results: Isolated dental pulp cells formed single cell derived colonies which showed fibroblast-like growth with solo cloning morphology. Specific staining of the cells indicated them to be stem cells and confirmed their differentiation into bone and fat. Moreover, Technetium significantly decreased the activity of cells. The survival rates of the cells in the period of 1,3,6,24,48 hours were reported to be 95.5%, 85.5%, 77.4%, 68.4%, and 57.3% respectively. Conclusion: The dental pulp stem cells have a significant capacity to differentiate into bone and fat. Tracing the cells with Tc M99 will reduce their survival rate over time. Key words: Stem Cell; Dental Pulp; Technetium TC 99m Res Dent Sci 2013;10(4): 266-272