القاي آپوپتوز توسط كانتاريدين در پروماستيگوت ها و ماكروفاژهاي آلوده به آماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور در شرايط آزمايشگاهي

Cantharidin-Induced Apoptosis in Leishmania Major Promastigotes and Macrophages Infected by Leishmania Major Amastigotes in Vitro

سابقه و هدف : ليشمانيا تك ياخته ايي تاژكدار عامل ليشمانيوزيس است و مشكل عمده سلامت در بسياري از كشورها، و Meloidae به خصوص در كشورهاي در حال توسعه است. كانتاريدين تركيبي ترپنوييدي است كه در سوسك هاي خانواده وجود دارد و ماده ايي تاول زاست كه درسلول هاي سرطاني، مرگ برنامه ريزي شده را القا مي كند. اين مطالعه Oedomeridae جهت تعيين اثركانتاريدين در القا مرگ برنامه ريزي شده سلولي در پروماستيگوت و ماكروفاژ آلوده به ليشمانيا صورت گرفت. 0 تا 50 ميكروگرم در ميلي ليتر، بر / مواد و روش ها: در اين مطالعه تجربي اثر كانتاريدين با غلظت هاي 5 5 ميكروگرم در ميلي ليتر بر ماكروفاژ آلوده به ليشمانيا ماژور در ، پروماستيگوت ليشمانيا ماژور و غلظت هاي 50 و 20 48 و 72 ساعت، با فلوسايتومتري بررسي شد. ، شرايط آزمايشگاهي پس از گذشت 24 0 ميكروگرم در ميلي ليتر دي متيل سولفوك يد / يافته ها: نتايج نشان داد كه كانتاريدين با غلظت 50 و 5 63 درصد مرگ / 68 درصد كشندگي ( 23 / پس از 72 ساعت در پروماستيگوت ها به ترتيب 5 (Dimethy1 sulfoxid: DMSO) 14 درصد كشندگي / 5 د رصد مرگ برنامه ريزي شده تاخيري و صفر درصد نكروز ) و 29 / برنامه ريزي شده سلولي، 27 0 درصد نكروز ) مي دهد. ميزان كشندگي / 1 درصد مرگ برنامه ريزي شده تاخيري و 05 / 13/12 مرگ برنامه ريزي شده، 12 ) 43 درصد / 61 درصد ( 42 / كانتاريدين 50 و 5 ميكروگرم در ميلي ليتر بر ماكروفاژ آلوده پس از گذشت 48 ساعت به ترتيب 81 31/ 44 درصد ( 05 / 17 درصد نكروز ) و 44 / 1 درصد مرگ برنامه ريزي شده تاخيري و 11 / مرگ برنامه ريزي شده سلولي ، 27 3 درصد مرگ برنامه ريزي شده تاخيري ) بود. همچنين ميزان / 10 درصد نكروز و 31 / درصد مرگ برنامه ريزي شده سلولي، 08 49 درصد / كشندگي كانتاريدين 50 و 5 ميكروگرم در ميلي ليتر بر ماكروفاژ غيرآلوده پس از گذشت 48 ساعت ب ه ترتيب 34 43/ 23 درصد نكروز ) و 79 / 4 درصد مرگ برنامه ريزي شده تاخيري و 76 / 21/35 درصد مرگ برنامه ريزي شده سلولي، 23 ) 1 درصد مرگ برنامه ريزي شده تاخيري) بود. / 7 درصد نكروز و 61 / 34 درصد مرگ برنامه ريزي شده سلولي، 27 / درصد ( 9 استنتاج: نتايج نشان داد كه كانتاريدين در زمان و غلظت هاي متفاوت باعث القاي مرگ برنامه ريزي شده سلولي در پروماستيگوت هاي ليشمانيا ماژور و ماكروفاژ آلوده به ليشمانيا ماژور مي شود.

Background and purpose: Leishmania is flagellated protozoa and causative agent of leishmaniosis. It is one of the main public health problems in developing countries. Cantharidin is terpenoid component that exists in Meloidae and Oedemeridae beetles. Cantharidin is vesicant and could induce apoptosis in cancerous cells. This study was performed to determine the role of cantharidin in inducing apoptosis in the Leishmania promastigotes and macrophages infected with parasite. Materials and methods: In this experimental study the effect of cantharidin was evaluated at concentration range of 0.5-50 ?g/mL on the L. major promastigotes and concentration range of 5, 20 and 50?g/mL on macrophages infected with L. major after 24, 48 and 72hrs by flow cytometry assay. Results: Results showed that cantharidin with concentration levels of 50 ?g/mL and 0.5 ?g/mL has 68.50% cytotoxicity (as 63.23% apoptosis, 5.27% late apoptosis and 0% necrosis) and 14.29% cytotoxicity (as 13.12% apoptosis, 1.12% late apoptosis and 0.05% necrosis) in promastigotes after 72hrs, respectively. Cytotoxicity 0.5 ?g/mL and 50 ?g/mL cantharidin in infected macrophages after 48hrs was 61.81% (as 43.42% apoptosis, 1.27% late apoptosis and 17.11% necrosis) and 44.44% (as 31.05% apoptosis, 10.08% necrosis and 3.31% late apoptosis), respectively. Cytotoxicity of 50?g/mL and 5?g/mL cantharidin in non-infected macrophages after 48hrs was also 49.34% (as 21.35% apoptosis, 4.23% late apoptosis and 23.76% necrosis) and 43.79% (as 34.90% apoptosis, 7.27% necrosis and 1.61% late apoptosis), respectively. Conclusion: This research indicates that cantharidin at different concentration and times could induce apoptosis in L. major promastigotes and macrophages infected with amastigotes.